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qa-3稀有密码子和mRNA结构改造及其在大肠杆菌中的高效表达
奎尼酸脱氢酶的高表达是奎尼酸生物合成的代谢工程研究的的基因qa-3在大肠杆菌中不表达,根据大肠杆菌密码子使用频率分析qa-3基因,发现有27个稀有密码子,其中编码Arg(R)的有8个,编码Gly(G)的有9个.编码精氨酸的AGG(AGA)两个稀有密码子紧密相连(R区),另外还有个相对比较集中的GGG密集区G区.进一步通过计算机分析其qa-3基因mRNA二级结构,发现改变5′和3′末端个别碱基对其二级结构的影响很大,可以使mRNA的自由能由野生型的-374.3 kJ/mol降低到最小-80.5 kJ/mol,从而大大减少mRNA两端二级结构的产生,而仅仅改变R区和G区的稀有密码子自由能变化很小.通过对该基因密码子改造和优化5′和3′末端对其mRNA二级结构的影响,在大肠杆菌中表达真菌的基因qa-3,并测到了奎尼酸脱氢酶活性,为构建产奎尼酸工程菌株奠定基础.
作 者： 刘礼兵 刘云 何华庆 李永辉 徐琪寿 LIU Li-Bing LIU Yun HE Hua-Qing LI Yong-Hui XU Qi-Shou 作者单位： 刊 名： 生物工程学报 ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 2006 22(2) 分类号： Q786 关键词： qa-3 密码子 mRNA二级结构 奎尼酸脱氢酶【qa-3稀有密码子和mRNA结构改造及其在大肠杆菌中的高效表达】相关文章：
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