人IGF-1在大肠杆菌中的可溶表达和纯化

人IGF-1在大肠杆菌中的可溶表达和纯化

目的:在大肠杆菌中的可溶表达和纯化人胰岛素样生长因子1(hIGF-1).方法:根据hIGF-1的氨基酸序列和大肠杆菌密码子偏爱性,利用重叠延伸PCR的方法合成hIGF-1 DNA序列,构建表达载体,在大肠杆菌Origami B(DE3)中与硫氧还蛋白Trx A融合表达,并通过盐析和镍柱亲合层析进行纯化.结果:SDS-PAGE分析显示,重组融合蛋白以可溶形式存在,分子量约为28 kDa,占上清总蛋白的50%以上.经盐析和镍柱亲合层析进行纯化,目标蛋白纯度可达到90%左右.结论:复合干扰素在大肠杆菌中的高效可溶表达.

作 者： 张守涛 梁会娟 张芸   作者单位： 张守涛(郑州大学生物工程系,河南郑州,450001)

梁会娟,张芸(河南富邦药业有限公司,河南郑州,450001) 

刊 名： 生物技术  PKU 英文刊名： BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2010 20(2)  分类号： Q819 Q786  关键词： 人胰岛素样生长因子1   硫氧还蛋白   可溶表达   纯化   Higf-1   Trx A   soluble expression   purification  

【人IGF-1在大肠杆菌中的可溶表达和纯化】相关文章：

基因重组BDNF蛋白在大肠杆菌中的表达纯化与功能鉴定04-26

Barnase在大肠杆菌中的分泌表达和诱导条件优化04-27

B型肉毒毒素保护性抗原He在大肠杆菌中的可溶性高表达04-27

水稻可溶性糖蛋白的纯化与鉴定研究04-26

葛仙米中SOD基因的克隆及在大肠杆菌中的表达04-27

帕金森病相关蛋白α-共核蛋白的可溶性表达、纯化及抗体制备04-26

人SM22α在巴斯德毕赤酵母中的表达、纯化及抗体制备04-26

大肠杆菌RNaseⅢ基因的克隆与表达04-26

几丁质酶基因表达载体pET-chiB的构建及其在大肠杆菌中的诱导表达04-27

甲醇利用菌SDM11中glyA基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达04-26