重组酶Cre基因在大肠杆菌中的高效表达及其一步纯化和活性检测

重组酶Cre基因在大肠杆菌中的高效表达及其一步纯化和活性检测

为了实现DNA重组酶Cre在体外的应用,以pET-30a高效表达载体为基础构建了pTE30-Cre质粒.将此质粒导入大肠杆菌BL21(DE3)中进行IPTG诱导的Cre基因的高效表达.对表达出的Cre重组酶蛋白进行镍离子鳌合法一步纯化,并以带有两个同向loxP位点的质粒为底物,对纯化出的Cre酶进行活性检测.该实验为Cre酶的体外应用奠定了基础.

作 者： 王文棋 盖颖 陆海 蒋湘宁 WANG Wen-qi GAI Ying LU Hai JIANG Xiang-ning   作者单位： 北京林业大学生物科学与技术学院  刊 名： 北京林业大学学报  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF BEIJING FORESTRY UNIVERSITY  年，卷(期)： 2006 28(3)  分类号： Q559+.1  关键词： DNA重组酶Cre   pET30-Cre高效表达   一步纯化   Cre酶活性检测  

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