人工合成草鱼生长激素cDNA在大肠杆菌中的表达

人工合成草鱼生长激素cDNA在大肠杆菌中的表达

经密码子优化的人工合成草鱼生长激素cDNA与表达载体pET-28a(+)重组，构建重组表达质粒pET-GH。转化大肠杆菌BL21(DE3)，筛选阳性克隆，IPTG诱导表达。12.5％的SDS-PAGE分析显示，大肠杆菌表达产物中含有与草鱼生长激素分子量一致的新增蛋白带，激光密度扫描，其产量约占菌体总蛋白的40％。金属离子螯合层析柱亲和纯化，获得电泳纯的重组蛋白。Western-blotting和酶联免疫吸附受体法检测证实：重组蛋白与抗草鱼生长激素的多克隆抗体发生特异性结合；复性后的重组蛋白有与天然草鱼生长激素一致的生物学活性。

作 者： 王伟 汪亚平 朱作言 WANG Wei WANG Ya-Ping ZHU Zuo-Yan   作者单位： 中国科学院水生生物研究所,  刊 名： 遗传学报  ISTIC SCI PKU 英文刊名： ACTA CENETICA SINICA  年，卷(期)： 2001 28(4)  分类号： Q95  关键词： 草鱼生长激素   原核表达   纯化   酶联免疫吸附受体检测  

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