pfl-act基因在大肠杆菌中的高效表达及其纯化

pfl-act基因在大肠杆菌中的高效表达及其纯化

丙酮酸甲酸裂解酶是肠道细菌在厌氧代谢中十分关键的酶,丙酮酸甲酸裂解酶激活因子(pyruvate formate lyase activator,PFL-A)在功能上具有重要的作用.为进一步研究PFL-A的激活机理,以大肠杆菌K-12的基因组为模板,通过GenBank上公布的序列设计引物,扩增出目的基因,克隆到pMD18-T载体,经测序,所扩增出的基因与pfl-act基因具有99%的同源性.将pfl-act连接到高效表达载体pET-22b(+)中,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导,结果发现,pfl-act以包涵体形式表达.改变诱导剂、诱导剂量或培养温度,对包涵体的形成均没有明显的影响.

作 者： 杨登峰 韦宇拓 黄志明 周兴 黄日波 YANG Deng-feng WEI Yu-tuo HUANG Zhi-ming ZHOU Xing HUANG Ri-bo   作者单位： 杨登峰,黄志明,周兴,YANG Deng-feng,HUANG Zhi-ming,ZHOU Xing(广西科学院,广西,南宁,530003)

韦宇拓,黄日波,WEI Yu-tuo,HUANG Ri-bo(广西大学,生命科学与技术学院,广西,南宁,530005;广西亚热带生物资源保护利用重点实验室,广西,南宁,530005) 

刊 名： 广西农业生物科学  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF GUANGXI AGRICULTURAL AND BIOLOGICAL SCIENCE  年，卷(期)： 2006 25(4)  分类号： Q782  关键词： 丙酮酸甲酸裂解酶激活因子   包涵体   高效表达  

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