嗜肺军团菌lvgA基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

嗜肺军团菌lvgA基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

本实验采用聚合酶链反应(PCR)从嗜肺军团菌基因组DNA中扩增得到军团菌毒力基因(Legionella virulence gene,lvg A gene),并将其定向连接入克隆载体pUC18,构建重组质粒pUlvgA,重组子经限制性内切酶分析、聚合酶链式反应及测序鉴定后,再将lvgA基因亚克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,构建原核表达重组质粒pGlvgA,转化宿主菌JM109,IPTG诱导表达,产物进行SDS-PAGE电泳、免疫印记分析鉴定.实验结果表明,成功扩增出627 bp的lvgA基因,构建了重组质粒pUlvgA及原核表达重组质粒pGlvgA,并使53.7 KDa 的GST-lvgA融合蛋白质在原核系统中得到了有效的表达.

作 者： 刘明杰 陈建平 廖涛 芦殿香 陈宪 Liu Mingjie Chen Jianping Liao Tao Lu Dianxiang Chen Xian   作者单位： 四川大学,华西基础医学与法医学院,寄生虫学教研室,形态学实验室,成都,610041  刊 名： 生物医学工程学杂志  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF BIOMEDICAL ENGINEERING  年，卷(期)： 2006 23(3)  分类号： Q78  关键词： 军团菌   lvgA基因   聚合酶链式反应   基因表达  

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