枸杞中IPP异构酶相关基因(IPI)的分离

枸杞中IPP异构酶相关基因(IPI)的分离

以宁夏枸杞叶片为材料,采用异硫氰酸胍-酚-氯仿法提取完整的总RNA,利用PolyATract mRNA I-solation System(Promega公司)分离mRNA,然后利用Universal RibocloneRcDNA Synthesis System(Promega公司)合成双链cDNA,在cDNA末端连接上EcoR Ⅰ接头,并与λExCell载体连接,利用PackageneLambda DNA Packaging System进行包装,构建出滴度为2.78×105pfu/mL,重组效率为88.1%的枸杞叶片cDNA文库.用Digoxigenin(DIG)标记龙胆草IPI探针,并对枸杞叶片cDNA文库进行筛选,获得7个IPIcDNA阳性克隆.释放质粒后,进行酶切鉴定,IPI阳性克隆cDNA插入片段的大小为1.5kb左右.

作 者： 张爱香 季静 王罡 抗艳红 ZHANG Ai-xiang JI Jing WANG Gang KANG Yan-hong   作者单位： 张爱香,ZHANG Ai-xiang(河北北方学院农学系,河北,张家口,075131;天津大学农业与生物工程学院,天津,300072)

季静,王罡,JI Jing,WANG Gang(天津大学农业与生物工程学院,天津,300072)

抗艳红,KANG Yan-hong(河北北方学院农学系,河北,张家口,075131) 

刊 名： 西北农业学报  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA AGRICULTURAE BOREALI-OCCIDENTALIS SINICA  年，卷(期)： 2006 15(3)  分类号： Q784  关键词： 枸杞   叶片   cDNA文库   IPI   基因   分离  

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