臭鼻杆菌腈水解酶基因(bxn)的克隆及其在原核生物中的表达

时间:2023-04-27 14:40:07 工业农业论文 我要投稿
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臭鼻杆菌腈水解酶基因(bxn)的克隆及其在原核生物中的表达

通过PCR技术从克雷伯氏臭鼻杆菌基因组DNA中克隆到编码腈水解酶的基因(bxn),插入pET28a(+)载体的Nco I和Sac I之间,构建了bxn基因的原核生物表达载体pET-BX.通过SDS-PAGE鉴定出重组克隆,在大肠杆菌 BL21(DE3)中表达出了一种37.7 kD的特异蛋白,其表达量占宿主菌总蛋白的18.2%.在添加终浓度为4 mmol/L的乳糖和28℃培养条件下,重组克隆菌可表达较高产量的特异酶蛋白,可将溴苯腈降解为无毒物质,并具有较高活性.

臭鼻杆菌腈水解酶基因(bxn)的克隆及其在原核生物中的表达

作 者: 张金文 熊春蓉 李静雯 王旺田 孟亚雄 陈正华 ZHANG Jin-wen XIONG Chun-rong LI Jing-wen WANG Wang-tian MENG Ya-xiong CHEN Zheng-hua   作者单位: 张金文,李静雯,王旺田,孟亚雄,ZHANG Jin-wen,LI Jing-wen,WANG Wang-tian,MENG Ya-xiong(甘肃农业大学农学院,甘肃,兰州,730070)

熊春蓉,XIONG Chun-rong(甘肃省农业技术推广总站,甘肃,兰州,730020)

陈正华,CHEN Zheng-hua(甘肃省亚盛集团博士后流动站,北京,100101) 

刊 名: 草业学报  ISTIC PKU 英文刊名: ACTA PRATACULTURAE SINICA  年,卷(期): 2006 15(6)  分类号: S451.23 Q943.2  关键词: 腈水解酶基因   pET28a(+)   酶活性   温度   乳糖  

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