贵阳腐霉几丁质酶的活性及基因片段克隆与序列

贵阳腐霉几丁质酶的活性及基因片段克隆与序列

目的: 研究贵阳腐霉(Pythium guiyangense Su)几丁质酶的活性及其基因片段的克隆与序列分析.方法: (1) 采用3,5-二硝基水杨酸比色法测定贵阳腐霉分泌的几丁质酶活性;(2)根据NCBI Protein 数据库中多种生物的几丁质酶氨基酸序列的保守区设计引物,以贵阳腐霉基因组DNA为模版,通过PCR扩增获得特异性DNA片段;(3)将该片段克隆并进行测序分析.结果: 贵阳腐霉经诱导后可以分泌几丁质酶.诱导24 h是该酶分泌高峰期.克隆到一207?bp的DNA片段,其第182～207碱基序列与狗(Canis familiaris)的几丁质酶基因的部分序列相同.结论: 本实验证明贵阳腐霉核DNA含有几丁质酶基因,在几丁质类似物的诱导下,该菌可以分泌几丁质酶.所克隆的DNA片段可能是几丁质酶基因的部分序列.

作 者： 洪焱 苏晓庆 HONG Yan SU Xiaoqing   作者单位： 洪焱,HONG Yan(贵阳市妇幼保健院生殖遗传科)

苏晓庆,SU Xiaoqing(贵阳医学院,生物学教研室,贵州,贵阳,550004) 

刊 名： 贵阳医学院学报  ISTIC 英文刊名： JOURNAL OF GUIYANG MEDICAL COLLEGE  年，卷(期)： 2008 33(1)  分类号： Q949.323.3 Q936  关键词： 真菌   灭蚊   聚合酶链反应   贵阳腐霉   几丁质酶   几丁质酶活性  

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