钙网蛋白-N58在毕赤酵母中的表达及活性分析

时间:2023-04-27 04:28:45 生物医学论文 我要投稿
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钙网蛋白-N58在毕赤酵母中的表达及活性分析

目的:利用毕赤酵母表达系统表达Calreticulin-N58蛋白.方法:利用重叠延伸PCR方法合成Calreticulin-N58基因,构建成分泌型的重组表达载体pPIC9K-CRT-N58.该重组表达载体经Sac I线性化后,电激转化人毕赤酵母GS115,经MD板和不同浓度G418筛选得到多拷贝重组菌株.经甲醇诱导表达目的蛋白,SDS-PAGE分析重组蛋白的表达情况,在鸡胚中进行活性分析.结果:重组质粒pPIC9K-CRT-N58在毕赤酵母中经甲醇诱导能分泌表达CRT-N58蛋白,摇瓶表达量大约为60mg/L,纯化的目的蛋白有显著的血管生成抑制作用.结论:实验成功地在毕赤酵母表达系统中实现了Calreticulin-N58的分泌表达.为Calreticulin-N58蛋白的进一步药用研究奠定了基础.

作 者: 周细南 苏东晓 潘英文 张添元 张爱联 ZHOU Xi-nan SU Dong-xiao PAN Ying-wen ZHANG Tian-yuan ZHANG Ai-lian   作者单位: 中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室,海南海口,571101  刊 名: 生物技术  PKU 英文刊名: BIOTECHNOLOGY  年,卷(期): 2008 18(3)  分类号: Q786  关键词: calreticulin-N58   毕赤酵母   分泌表达   生物活性  

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