朱鹮RAPD反应体系优化研究

朱鹮RAPD反应体系优化研究

目的 研究朱鹮RAPD反应中Mg2+浓度、复性温度、引物浓度、Tag酶浓度和DNA模板量等几种因素对扩增结果的影响,并探讨反应的最优条件.方法 以朱鹮DNA为材料进行RAPD试验,对Mg2+浓度、复性温度、引物浓度、Tag酶浓度和DNA模板量进行梯度设置,每次仅改变一个参数,并保持其他条件不变.结果 建立了一套适用于朱鹮的RAPD反应体系.结论 优化后的朱鹮RAPD反应条件为:反应总体积25μL,其中含Mg2+(25 mM)2.5 μL,10×Buffer2.5 μL,dNTPs(10mM)0.5 μL,引物(8 μmol/L)1.0 μL,Tag酶(3 U/μL)0.4 μL,DNA模板(10 ng/μL)3.0 μL;PCR循环中复性温度为37℃.

作 者： 石张燕 蒙世杰 丁长青 SHI Zhang-yan MENG Shi-jie DING Chang-qing   作者单位： 石张燕,蒙世杰,SHI Zhang-yan,MENG Shi-jie(西北大学,生命科学学院,陕西,西安,710069)

丁长青,DING Chang-qing(中国科学院,动物研究所,北京,100080) 

刊 名： 西北大学学报（自然科学版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF NORTHWEST UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)  年，卷(期)： 2006 36(6)  分类号： Q755  关键词： RAPD   朱鹮   反应体系  

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