随机十肽库的构建及血管形成素结合肽的筛选

随机十肽库的构建及血管形成素结合肽的筛选

将合成的含有随机序列(NNK)10的寡核苷酸片段,克隆入噬菌体呈现载体噬菌粒pCANTAB5E的SfiⅠ,NotⅠ位点,即cpⅢ蛋白信号肽与成熟肽之间,电转化E.coli TG1,构建了噬菌体表面呈现的十肽库,实际库容为3.53×107,插入率为66.7%.经辅助噬菌体M13KO7超感染后,获得滴度为4.8 ×1011 pfu/ml的噬菌体上清.经过两轮panning筛选和富集,从构建的随机十肽库中筛选到26个具有血管形成素结合活性的重组噬菌体克隆,对其中12个阳性噬菌体克隆的短肽序列进行了分析,ELISA检测结果显示12个阳性噬菌体克隆都能够与血管形成素特异性结合.

作 者： 杨辉 张英起 颜真 韩苇 药立波 苏成芝 YANG Hui ZHANG Ying-Qi YAN Zhen HAN Wei YAO Li-Bo SU Cheng-Zhi   作者单位： 杨辉,张英起,颜真,韩苇,YANG Hui,ZHANG Ying-Qi,YAN Zhen,HAN Wei(第四军医大学生物技术中心,西安,710032)

药立波,苏成芝,YAO Li-Bo,SU Cheng-Zhi(第四军医大学生物化学与分子生物学教研室,西安,710032) 

刊 名： 生物化学与生物物理进展  ISTIC SCI PKU 英文刊名： PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS  年，卷(期)： 2000 27(6)  分类号： Q74  关键词： 噬菌体表面呈现   随机短肽库   血管形成素  

【随机十肽库的构建及血管形成素结合肽的筛选】相关文章：

牛肉风味强化肽(BMP)表达载体的构建04-26

酶法制备牦牛乳酪蛋白源血管紧张素转换酶抑制肽04-27

噬菌体改组库的构建及高活性水蛭素变异体的筛选04-26

融合蛋白连接肽的研究进展04-27

产脂肽生物表面活性剂细菌的筛选及培养基优化04-26

结缔组织生长因子特异性结合肽的表达及分离纯化04-26

家蝇幼虫培养及其抗菌肽的初步研究04-26

芽孢杆菌非核糖体肽的研究进展04-26

抗菌肽在棉花、烟草组织培养中的应用初探04-27

小肽对猪的营养生理功能及研究应用04-26