抗果蝇Trio蛋白抗体的制备及鉴定

时间:2023-04-26 16:50:28 生物医学论文 我要投稿
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抗果蝇Trio蛋白抗体的制备及鉴定

目的:制备兔抗果蝇Trio蛋白的抗体.方法:以RT-PCR扩增Trio的1 173 bp的基因片段并克隆入pET28a(+) 和pGEX-4T-1 (His)6C表达载体中,表达并纯化Trio-His、Trio-GST融合蛋白.用纯化的Trio-His融合蛋白免疫家兔产生抗Trio的抗体,用Trio-GST亲和层析法进行纯化并采用Western blot法检测抗体生物学活性.结果:表达的Trio-His蛋白以包涵体的形式存在,用His亲和层析法分离纯化后得到较纯的Trio-His融合蛋白,以纯化的Trio-His免疫家兔制备的兔抗Trio的抗体,经Western blot分析显示该抗体可与果蝇S2细胞Trio特异性结合.结论:获得具有良好特异性的兔抗Trio抗体,为进一步研究Trio的功能奠定了基础.

作 者: 缪峰 吕雯雯 丁洁 袁榴娣 MIAO Feng Lü Wen-wen DING Jie YUAN Liu-di   作者单位: 东南大学,发育与疾病相关基因教育部重点实验室,江苏,南京,210009  刊 名: 东南大学学报(医学版)  ISTIC 英文刊名: JOURNAL OF SOUTHEAST UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION)  年,卷(期): 2008 27(4)  分类号: Q786  关键词: Trio基因   原核表达   抗体制备  

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