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透析袋的预处理和保存
透析袋通常是由半透膜制成的袋状容器,在生物大分子的制备过程中,除去盐,少量有机溶剂,生物小分子杂质和浓缩样品时都要用到透析的技术透析袋。下面是小编整理的透析袋的预处理和保存,欢迎大家阅读。
透析袋预处理方法
(1)将透析管剪成适当长度,10-20cm的小段,即形成透析袋。
(2)在大体积2%(m/V)碳酸氢钠和1mmol/LEDTA(PH*8.0)中将透析袋煮沸10min。
(3)将透析袋用蒸馏水彻底漂洗。
(4)将透第一文库网析袋置1mmol/L EDTA(PH*8.0)中煮沸10min。
(5)将透析袋冷却,存放于4摄氏度,应确保透析袋始终浸没在液体中。重要:从此步起用透析袋时一定要带手套操作。
(6)在使用前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗。
用过的透析袋保存前需要怎么处理?
用生理盐水浸泡以去掉蛋白,并用蒸馏水清洗干净,然后置50%乙醇中保存即可;用完以后,要彻底洗干净,透析袋也可以保存在0.1%叠氮钠(可防止微生物生长)里;0.05%-0.1%叠氮钠,或者1mM EDTA,或者50%甘油中4度保存,公司的人建议前两种保存比较好!
透析袋(别称:透析膜)通常是由半透膜制成的袋状容器。在生物大分子的制备过程中,除去盐、少量有机溶剂、生物小分子杂质和浓缩样品时都要用到透析的技术。
市面上的透析袋分两种,透彻了解两者的区别
1、湿型包装:此款透析袋为即用型,不可煮,也不需要煮,只需用纯水彻底冲洗即可;一般1米。
2、 干型包装:此款透析袋为即用型,不可煮,也不需要煮,使用前用纯水浸泡漂洗;一般5米。
区别:就在于干型需要组预处理,而即用型可以直接清洗后使用。所以能用干型可以尽可能用干型的,虽然略微复杂一些 但是真的性价比超高!
一、即用湿型透析袋的处理和使用方法:
特别提示:湿型透析袋的储存液中含有0.05%叠氮钠,使用者务必配带手套操作!
1、储存条件:
透析膜浸泡在储存液中,封放置于 4-37 °C之间环境,有效期3年。
2、透析袋使用方法:
①把透析袋剪成适当长度(10cm-20 左右)的小段。
②用去离子水浸泡 10 分钟左右,再用去离子水膜内冲洗3次。
③不使用的透析膜放回储存液中,密封保存,接触透析膜过程中必须戴手套。
④使用时,一端用透析袋夹子夹紧,灌满水后,用手指适当加压,检查不漏,方可装入样品。通常要留三分之一至一半的空间,以防透析过程中,袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。装完样品后,加样端用夹子夹紧袋口,可在袋内放一玻璃珠,以使透析袋处于悬浮状态,即可进行透析(详见透析袋装置简图)。为了加快透析速度,除多次更换透析液外,还可使用磁力搅拌器。透析的容器要大一些,可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。
二、即用干型透析袋的处理和使用方法:
1、储存条件:
干型透析膜表层涂有甘油保护层,封放置于 4-37 °C 之间环境,有效期5年,处理过的透析袋放置在透析袋储存液中,4-37 °C 之间环境有效期3年。
2、透析袋使用方法:
①把透析袋剪成适当长度( 10cm左右)的小段。
②用 60℃ 去离子水中水浴 30 分钟-1小时,再用去离子水膜内冲洗 3 次。
③使用时,一端用下沉透析袋夹子夹紧,灌满水后,用手指适当加压,检查不漏,方可装入样品。通常要留三分之一至一半的空间,以防透析过程中,袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。装完样品后,用上浮夹子夹紧袋口,可在袋内放一玻璃珠,以使透析袋处于悬浮状态,即可进行透析(详见透析袋装置简图)。为了加快透析速度,除多次更换透析液外,还可使用磁力搅拌器。透析的容器要大一些,可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。
使用步骤:
a.把适量的透析液(缓冲液)加入透析装置。透析液的体积应为样品体积量的 100 倍。(例如:在一升透析液中透析 10 毫升的样品)
b.裁剪适当长度的透析管。预留一段额外长度(约占总样品体积量的 20%)作为头部空间
c.把透析管插入打开的透析夹,在约超出透析夹 3-5 毫米的位置再夹住。不要折叠透析袋
d.由透析管开口端将样品装入。调整一下顶部空间的长度,夹紧透析夹
e.把透析样品放在合适的透析缓冲液中
f.透析要根据具体的应用需求。通常情况下,允许过夜透析。在持续透析的过程中,至少要进行3次全部更换透析液。建议在(透析后)2-4小时,6-8 小时和 10-14 小时(第 2 天早晨)更换透析液。在最后一次透析液的更换后要至少继续进行 2 小时的透析。
使用注意事项:
a. 透析袋不能在纯水中长期储存,会长菌,用1%苯甲酸钠溶液储存
b. 样品按推荐的单位长度容量加样,不可多加,样品浓度不可太大,否则容易导致膜涨破
c. 样品和透析液体积比一般是1:50~500
d. 对于高浓度污染物,样品可能需要较长的时间透析,透析液需要更频繁的更换。
e. 透析温度主要取决于样品。温度限制主要取决于膜的类型。湿型透析袋可以承受的温度高达 37℃,干型透析袋可以承受的温度高达 60℃。
f. 湿型透析袋或干型透析袋一旦变潮湿,不要让透析袋干燥。不断干燥会造成孔隙结构不可恢复的倒塌。
透析膜和透析袋处理方法、使用后的保存方法
透析膜 (前处理方法如下):
1. 戴手套把透析膜剪成适当长度,浸在蒸馏水中 15 min 泡软。
2. 浸入10 mM 碳酸氢钠(sodium bicarbonate)中,并加热至80℃,一边搅拌至少 30 min。
3. 换到10 mM Na2EDTA中浸泡 30 min,以新鲜的 EDTA 同样方法处理三次。
4. 再用80℃蒸馏水洗30 min,然后换到20%酒精中,放在4℃冰箱中保存。
使用前处理:
1. 把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段。
2. 在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟。
3. 用蒸馏水*清洗透析袋里外。
4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。
5. 冷却后,存放于4度,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。从此时起取用透析袋是必须戴手套。
6. 用前在透析袋内装满水然后排出,将之清洗干净。
透析袋的物理学抗力:
透析袋由再生纤维素构成,可以煮沸或消毒。 一旦已呈湿状即不可再*干躁,除非用甘油重处理。内含有液体的透析袋可冷冻。另外:透析袋的生物学抗力决定着透析袋的保存
透析袋使用后保存:
透析袋对于纤维素活性是敏感的,尤其在湿状时。可以避免溶纤维素的微生物生长,通过将透析袋保存在4°C含有0.05 % 叠氮钠(sodium azide)溶液, 或 4°C含有20 % 乙醇溶液,也可保存在50 % 甘油(glycerol)溶液。
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