少动鞘氨醇单胞菌ZX4儿茶酚2,3-双加氧酶基因的克隆与表达

少动鞘氨醇单胞菌ZX4儿茶酚2,3-双加氧酶基因的克隆与表达

摘要： 应用PCR方法克隆了少动鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas paucimobilis)ZX4菌株的儿茶酚2,3-双加氧酶基因(c23O-ZX4).核苷酸序列测定与分析表明,该基因片段全长924 bp且具有一个完整的阅读框,编码306个氨基酸残基.该基因与已报道的来自菌株S.yanoikuyae B1和Sphingomonas sp.KMG425的xylE基因(编码产物均为C23O)具有较高的核酸序列同源性,分别为94.37%和94.05%.通过Hind Ⅲ和Xho Ⅰ两个限制性酶切位点将该基因连接到质粒pET30(a)+上得到重组表达质粒pET-S3,并在E. coli BL21进行了表达,得到了42.3 kD的融合蛋白.酶活测定发现该基因工程菌株的发酵产酶活力明显高于出发菌株. 作 者： 周德平    吴淑杭    闵航    姜震方    ZHOU De-ping    WU Shu-hang    MIN Hang    JIANG Zhen-fang   作者单位： 周德平,吴淑杭,姜震方,ZHOU De-ping,WU Shu-hang,JIANG Zhen-fang(上海市农业科学院环境科学研究所,上海,201106)

闵航,MIN Hang(浙江大学生命科学院,杭州,310029) 

期 刊： 上海农业学报  ISTICPKU   Journal： ACTA AGRICULTURAE SHANGHAI  年，卷(期)： 2007, 23(2)  分类号： X172  关键词： 菲降解    少动鞘氨醇单胞菌    儿茶酚2,3-双加氧酶基因   

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