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人偏肺病毒TaqMan-MGB探针实时定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用
目的:建立人偏肺病毒(hMPV)核酸特异的快速、敏感的TaqMan-MGB探针实时定量RT-PCR检测方法.方法:分别设计hMPV特异的引物与荧光标记探针,合成hMPV绝对定量RNA模板,建立实时荧光定量PCR方法,并与常规RT-PCR平行比较,对其灵敏性、特异性和可重复性,以及用于临床样本的适用性等进行评价.结果:本方法可对hMPV进行特异性诊断,检测灵敏度可达10拷贝/25 μL,检测线性范围至少可达10 1～10 6拷贝/反应,且实验重复性好,初步应用于北京地区采集的158份临床鼻咽拭子标本,定量RT-PCR检出31份标本阳性,明显高于常规RT-PCR方法(22/158).结论:建立了人偏肺病毒TaqMan-MGB探针定量RT-PCR检测方法,并初步证实可用于临床鼻咽拭子标本的检测,为开展hMPV的流行监测及临床早期诊断提供了技术手段.
作 者： 陆柔剑 张陵林 谭文杰 周为民 王仲 彭堃 阮力 LU Rou-Jian ZHANG Ling-Lin TAN Wen-Jie ZHOU Wei-Min WANG Zhong PENG Kun RUAN Li 作者单位： 陆柔剑,张陵林,谭文杰,周为民,阮力,LU Rou-Jian,ZHANG Ling-Lin,TAN Wen-Jie,ZHOU Wei-Min,RUAN Li(中国疾病预防控制中心,病毒病预防控制所,北京,100052)王仲,WANG Zhong(北京协和医院,北京,100730)
彭堃,PENG Kun(北京市第六医院,北京,100007)
刊 名： 生物技术通讯 ISTIC 英文刊名： LETTERS IN BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 2008 19(2) 分类号： Q78 关键词： 人偏肺病毒 TaqMan-MGB探针 实时定量PCR【人偏肺病毒TaqMan-MGB探针实时定量RT-PCR检测方法的建立及初】相关文章：
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