结缔组织生长因子小干扰RNA的构建及其干扰效果检测

结缔组织生长因子小干扰RNA的构建及其干扰效果检测

目的:构建结缔组织生长因子(CTGF)基因的小干扰RNA(siRNA),并检测其对CTGF基因表达的干扰效果.方法:根据CTGF基因序列,设计2条合理的CTGF-siRNA,并将其克隆到siRNA载体pSliencer 2.1-U6 neo中,转化大肠杆菌DH5a,挑取阳性菌落进行酶切和测序鉴定;将构建成功的CTGF-siRNA重组质粒与带FLAG标签的CTGF表达载体共同转染人胚肾293T细胞,Western印迹检测siRNA的干扰效果.结果:构建了2个CTGF-siRNA重组质粒,2条siRNA都有干扰作用,其中一条的干扰效果可达75%以上.结论:构建的CTGF-siRNA可为进一步研究CTGF的功能提供参考.

作 者： 李勤操 郑喜邦 王晓晖 杨智洪 姜艳超 丁丽华 李杰萍 叶棋浓 LI Qin-Cao ZHENG Xi-Bang WANG Xiao-Hui YANG Zhi-Hon JIANG Yan-Chao DING Li-Hua LI Jie-pin YE Qi-Nong   作者单位： 李勤操,LI Qin-Cao(军事医学科学院,生物工程研究所,北京,100850;广西大学,动物科学技术学院,广西,南宁,530005)

郑喜邦,ZHENG Xi-Bang(广西大学,动物科学技术学院,广西,南宁,530005)

王晓晖,杨智洪,姜艳超,丁丽华,李杰萍,叶棋浓,WANG Xiao-Hui,YANG Zhi-Hon,JIANG Yan-Chao,DING Li-Hua,LI Jie-pin,YE Qi-Nong(军事医学科学院,生物工程研究所,北京,100850) 

刊 名： 生物技术通讯  ISTIC 英文刊名： LETTERS IN BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2008 19(3)  分类号： Q78  关键词： 结缔组织生长因子   小干扰RNA   表达载体  

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