鲫鱼酸性磷酸酶酶学特性及不同效应物对酶活力的影响

鲫鱼酸性磷酸酶酶学特性及不同效应物对酶活力的影响

经NaAc-HAc缓冲液(pH5.0)抽提,正丁醇处理,硫酸铵分级沉淀,DEAE-32离子交换层析,SephadexG-150凝胶过滤纯化,从鲫鱼内脏中分离纯化出电泳纯的酸性磷酸酶.该酶提纯倍数为30.82,比活力195.06U/mg.研究表明,该酶催化对硝基苯磷酸二钠水解反应,最适pH 4.8,pH小于4和大于7时不稳定;最适温度45℃,温度高于50℃不稳定;米氏常数为0.23 mmol/L,利用SDS-PAGE测定酶亚基分子量为33.3 kD.化学修饰剂SUAN、PMSF、DTT、NBS对该酶活力影响不大,BrAc和IAe有明显抑制作用.金属离子对该酶催化活力有不同影响,Na~+、K~+、Ni~(2+)、Co~(2+)影响不显著,Mg~(2+)、Ca~(2+)、Ba~(2+)、Mn~(2+)有激活作用,Ag~+、Cu~(2+)、pb~(2+)、Cd~(2+)有抑制作用,其中Mg~(2+)、Ca~(2+)、pb~(2+)、Cd~2对鲫鱼酸性磷酸酶荧光光谱的影响表明金属离子对酶活力的影响与酶构象改变有关.

作 者： 高举 赵欣平 詹付凤 张营 余同 GAO Ju ZHAO Xin-Ping ZHAN Fu-Feng ZHANG Ying YU Tong   作者单位： 四川大学生命科学学院,生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都,610065  刊 名： 水生生物学报  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA  年，卷(期)： 2010 34(2)  分类号： Q556  关键词： 酸性磷酸酶   纯化   酶学性质   化学修饰   金属离子   鲫鱼   Acid phosphatase   Purification   Properties   Chemical modification   Metal ions   Carassias auratus  

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