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细菌脱色酶TpmD的酶学特性研究
从嗜水气单胞菌DN322中分离纯化出能够对三苯基甲烷类染料结晶紫、碱性品红、灿烂绿及孔雀绿进行高效脱色的脱色酶,命名为TpmD.在测定TpmD分子量、等电点及对不同三苯基甲烷染料脱色的动力学参数、脱色过程对分子氧及NADH/NADPH具有依赖性的基础上,又进一步从黄素FAD/FMN对酶活力的影响、酶抑制剂、酶蛋白N-末端测序及酶溶液的特征吸收光谱等方面对TpmD的酶学本质进行了分析.结果表明,TpmD不含核黄素,其脱色活性也不因加入FAD或FMN而提高.TpmD的N-末端氨基酸序列与多种氧化还原酶具有同源性.甲吡酮及维生素C(Vc)对TpmD的脱色活性具有明显的抑制作用.TpmD酶蛋白的溶液在408nm处有一特征吸收峰,但在连二亚硫酸钠的还原条件下通入CO气体后,该酶却不具有P450酶在450nm处的特征吸收峰.上述结果显示脱色酶TpmD是一种新的氧化酶.
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