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棉铃虫细胞色素P450 CYP6B7基因的克隆与融合表达
细胞色素P450 CYP6B7被推测与棉铃虫Helicoverpa armigera对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性有关,但至今尚无CYP6B7参与杀虫剂代谢方面的直接证据.为揭示CYP6B7的代谢功能,作者以棉铃虫幼虫基因组DNA 为模板,以CYP6B7基因设计特异性引物,扩增出包含321 bp内含子的CYP6B7基因.用反向PCR的方法消除内含子,获得包含完整的CYP6B7基因的开放阅读框.将CYP6B7基因与pMAL-c2X载体连接,并转化E.coli TB1细胞,在IPTG诱导下,CYP6B7能与载体基因编码的麦芽糖结合蛋白(MBP)在大肠杆菌中融合表达,表达产物经直链淀粉(amylose) 柱亲和层析分离洗脱后,得到SDS-PAGE电泳纯的融合蛋白.
作 者: 马彩霞 李梅 邱星辉 何凤琴 刘惠霞 MA Cai-Xia LI Mei QIU Xing-Hui HE Feng-Qin LIU Hui-Xia 作者单位: 马彩霞,MA Cai-Xia(中国科学院动物研究所,农业虫害鼠害综合治理研究国家重点实验室,北京,100080;西北农林科技大学农药研究所,陕西杨凌,712100)李梅,邱星辉,何凤琴,LI Mei,QIU Xing-Hui,HE Feng-Qin(中国科学院动物研究所,农业虫害鼠害综合治理研究国家重点实验室,北京,100080)
刘惠霞,LIU Hui-Xia(西北农林科技大学农药研究所,陕西杨凌,712100)
刊 名: 昆虫学报 ISTIC PKU 英文刊名: ACTA ENTOMOLOGICA SINICA 年,卷(期): 2006 49(6) 分类号: Q965.9 关键词: 棉铃虫 细胞色素P450 CYP6B7 基因克隆 融合表达【棉铃虫细胞色素P450 CYP6B7基因的克隆与融合表达】相关文章:
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