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红色糖多孢菌A226-YA突变体构建及产物分析
目的:用红色糖多孢菌(前称糖多孢红霉菌)KR6突变体合成酮内酯类化合物3-脱氧-3-羰基-红霉内酯B,同时,KR6突变体不合成红霉素.方法:以红色糖多孢菌A226基因组DNA为模板,用重叠PCR技术扩增KR6酶域中Tyr2699密码子TAC突变为Ala密码子GCC的1 000 bp DNA序列,克隆到载体pWHM3上构建同源重组质粒pWHM3-YA.将pWHM3-YA转化到A226中,并整合到红霉素合成基因座,经染色体二次重组后筛选TAC突变为GCC的突变体A226-YA,再进行突变体A226-YA产物分析.结果:通过染色体同源重组,构建了红色糖多孢菌突变菌株A226-YA,Zabspec Fab质谱分析结果显示A226-YA突变体合成了3-脱氧-3-羰基-红霉内酯B,而没有检测到红霉素.结论:突变Tyr2699能有效失活KR6,但3-脱氧-3-羰基-红霉内酯B的产量较低.
作 者： 曹孟婵 张部昌 马清钧 CAO Meng-Chan ZHANG Bu-Chang MA Qing-Jun 作者单位： 曹孟婵,CAO Meng-Chan(安徽大学生命科学学院,合肥,230039;军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850)张部昌,ZHANG Bu-Chang(安徽大学生命科学学院,合肥,230039;军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850;安徽省生态工程与生物技术重点实验室,合肥,230039)
马清钧,MA Qing-Jun(军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850)
刊 名： 军事医学科学院院刊 ISTIC PKU 英文刊名： BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES 年，卷(期)： 2006 30(5) 分类号： Q789 关键词： 红色糖多孢菌 聚酮合成酶 酮还原酶 3-脱氧-3-羰基-红霉内酯B【红色糖多孢菌A226-YA突变体构建及产物分析】相关文章：
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