人防御素-5基因的克隆和真核表达载体的构建

人防御素-5基因的克隆和真核表达载体的构建

目的 对人防御素5(HD-5)基因进行克隆,构建真核表达载体HD5-pPICZαA.方法 从人cDNA文库中PCR扩增HD-5基因片段,用EcoR I和Xba I分别双酶切HD-5基因扩增产物和毕赤酵母表达载体pPICZαA,用T4DNA连接酶连接目的 基因片段和pPICZαA,然后转化到E.coil Top10中,Zeocin筛选转化子并进行PCR、酶切和序列鉴定.结果 提取阳性克隆的重组质粒,EeoR I和xba I双酶切后跑电泳获得预期条带;同时重组质粒经序列测定,证实HD-5基因正确插入pPICZαA中,插入位置、方向均正确.结论 成功构建人防御素5基因的真核表达载体HD5-pPICZαA,为HD-5蛋白的真核真核表达奠定基础.

作 者： 陆航 李华 吴学敏 单颖   作者单位： 陆航(辽宁医学院附属第一医院普外科,辽宁锦州,121000)

李华(辽宁医学院附属第一医院肿瘤科,辽宁锦州,121000)

吴学敏,单颖(辽宁医学院免疫与病原生物学教研室,辽宁锦州,121000) 

刊 名： 解剖科学进展  ISTIC 英文刊名： PROGRESS OF ANATOMICAL SCIENCES  年，卷(期)： 2010 16(3)  分类号： Q782  关键词： 人防御素-5   克隆   表达载体   毕赤酵母  

【人防御素-5基因的克隆和真核表达载体的构建】相关文章：

RS基因的植物表达载体和酵母表达载体构建04-27

大鼠CD40基因RNA干扰真核表达载体的构建及鉴定04-26

IL15/PAP融合蛋白基因克隆及其原核与植物表达载体的构建04-26

鸡CD3γδ基因cDNA的克隆及其真核表达质粒的构建04-26

人源胸腺素α原和白介素2融合蛋白的基因克隆与原核表达04-27

大鼠对氧磷酶1真核表达载体的构建及在体外的表达04-27

T7RNAP基因的克隆及其质体定位表达载体的构建04-26

人类α-actin 启动子真核表达载体的构建及应用04-26

人类GAD67基因扩增及pEGFP-C2-GAD67真核表达载体的构建04-26

烟草红素氧还蛋白基因NtRD1的克隆及其RNAi载体构建04-27