克鲁维酵母中外切菊粉酶基因在毕赤酵母中的表达研究

克鲁维酵母中外切菊粉酶基因在毕赤酵母中的表达研究

用PCR的方法从克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)ATCC12424中克隆出外切菊粉酶基因.将该基因克隆到毕赤酵母表达载体pHBM905C、pHBM906上,构建了外切菊粉酶毕赤酵母表达载体pHBM1200、pHBM1201.将两者转化毕赤酵母GS115,得到重组菌株GS115(pHBM1200)、GS115(pHBM1201),将这两种重组菌株进行摇瓶发酵,测得带α-信号肽的菌株GS115(pHBM1200)表达的外切菊粉酶最高酶活为89.43 U/mL,带自身信号肽的菌株GS115(pHBM1201)表达的外切菊粉酶最高酶活为14.828 U/mL.SDS-PAGE电泳表明,外切菊粉酶的表观分子量为90 kD.将外切菊粉酶用去糖基化酶endoH处理后,SDS-PAGE电泳表明,分子量为60 kD,和预计的分子量一致.

作 者： 祝林 陈晶晶 舒望云 王博 马立新 ZHU Lin CHEN Jing-jing SHU Wang-yun WANG Bo MA Li-xin   作者单位： 湖北大学,生命科学学院,湖北,武汉,430062  刊 名： 湖北大学学报（自然科学版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF HUBEI UNIVERSITY（NATURAL SCIENCE）  年，卷(期)： 2006 28(4)  分类号： Q786  关键词： 外切菊粉酶   克鲁维酵母   毕赤酵母   基因表达  

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