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白蛋白融合α-2b干扰素在毕赤酵母中的表达
α-2b干扰素的重组表达质粒pPIC9K-HSA-IFNα-2b经限制性内切酶SalI酶切线性化后电转化巴斯德毕赤酵母菌(P.Pastoris)SMD1168,将阳性转化子进行PCR鉴定和Mut表型鉴定并用甲醇诱导表达,Western-Blot结果表明白蛋白融合IFNα蛋白与IFNα抗体具有结合能力,Wish细胞-VSV病毒系统鉴定表达蛋白具有抗病毒生物活性.在摇瓶培养条件下,甲醇在0.5%~4.0%的范围,随着浓度的升高蛋白表达量也升高,在其他因素固定时,菌体起始OD值在5~80的范围内,随着OD值的升高表达量反而下降.成功表达出具有高生物学活性的白蛋白融合干扰素蛋白(HSA-IFNα-2b),为进一步应用打下基础.
作 者: 张伍魁 范清林 邹文艺 仲皙 宋礼华 ZHANG Wu-kui FAN Qing-lin ZOU Wen-yi ZHONG Xi SONG Li-hua 作者单位: 张伍魁,ZHANG Wu-kui(安徽医科大学基础医学院,合肥,230032)范清林,邹文艺,FAN Qing-lin,ZOU Wen-yi(安徽安科生物工程股份有限公司,合肥,230088)
仲皙,ZHONG Xi(中国药科大学,南京,210009)
宋礼华,SONG Li-hua(安徽医科大学基础医学院,合肥,230032;安徽安科生物工程股份有限公司,合肥,230088)
刊 名: 中国生物工程杂志 ISTIC PKU 英文刊名: CHINA BIOTECHNOLOGY 年,卷(期): 2005 25(12) 分类号: Q81 关键词: 白蛋白融合α-2b干扰素 巴斯德毕赤酵母菌 Wish细胞-VSV病毒系统【白蛋白融合α-2b干扰素在毕赤酵母中的表达】相关文章:
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