枯草芽孢杆菌β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中的分泌表达

枯草芽孢杆菌β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中的分泌表达

目的:研制高效分泌表达枯草芽孢杆菌β-甘露聚糖酶的毕赤酵母基因工程菌株.方法与结果:将优化设计的枯草芽孢杆菌MA139 β-甘露聚糖酶基因用EcoR Ⅰ/XbαⅠ双酶切,克隆到诱导型表达载体pPICzαA中α因子信号肽编码序列的下游,转化大肠杆菌筛选重组质粒,转化毕赤酵母X-33感受态细胞,经Zeocin筛选,获得重组表达菌株X-33/mann.将重组菌株在10 L全自动发酵罐中进行高密度发酵培养,甲醇诱导72 h发酵活力达到2100 U/mL.重组甘露聚糖酶的最适催化温度为40℃,最适催化pH值为6.0.结论:枯草芽孢杆菌β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中获得了高效分泌表达,具有开发作为饲料添加剂的潜能.

作 者： 马威 沈志娜 陈轶群 李志民 曹云鹤 MA Wei SHEN Zhi-Na CHEN Yi-Qun LI Zhi-Min CAO Yun-He   作者单位： 马威,陈轶群,李志民,曹云鹤,MA Wei,CHEN Yi-Qun,LI Zhi-Min,CAO Yun-He(中国农业大学,动物营养学国家重点实验室,北京,100193)

沈志娜,SHEN Zhi-Na(哈尔滨师范大学,生命科学院,黑龙江,哈尔滨,150025) 

刊 名： 生物技术通讯  ISTIC 英文刊名： LETTERS IN BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2010 21(2)  分类号： Q785  关键词： β-甘露聚糖酶   枯草芽孢杆菌   毕赤酵母   分泌表达  

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