苏云金杆菌辅助蛋白P19对杀虫晶体蛋白Cry11Aa表达的影响

苏云金杆菌辅助蛋白P19对杀虫晶体蛋白Cry11Aa表达的影响

苏云金杆菌以色列亚种的p19基因、cry11Aa基因和p20基因位于同一操纵子上,据推测辅助蛋白P19可能与Cry11Aa蛋白的晶体化相关.本研究利用穿梭载体pHT3101构建了两个重组质粒pHcy1和pHcy3,两质粒均携带cry11Aa基因,但后者完全缺失了cry11Aa基因上游的p19基因.将重组质粒电激转化至苏云金杆菌无晶体突变株4Q7中进行蛋白表达,SDS-PAGE结果表明在4Q7(pHcy1)和4Q7(pHcy3)中均能检测到正常表达的Cry11Aa蛋白,但单位体积培养液的Cry11Aa蛋白在辅助蛋白P19存在时的表达量明显高于其单独表达的表达量;透射电镜观察显示两菌株中的Cry11Aa蛋白形成了大小相近、形状相似的双梯形晶体;另外,生物测定结果表明重组菌株4Q7(pHcy1)和4Q7(pHcy3)对三龄致倦库蚊的杀虫活性没有显著性差异.该现象说明辅助蛋白P19的缺失对Cry11Aa蛋白的晶体形成和杀蚊活性没有影响,但P19作为分子伴侣在一定程度上帮助提高了Cry11Aa蛋白的表达水平.

作 者： 师永霞 曾少灵 袁美妗 孙钒 庞义 SHI Yong-xia ZENG Shao-ling YUAN Mei-jin SUN Fan PANG Yi   作者单位： 师永霞,SHI Yong-xia(中山大学生命科学学院,有害生物控制与资源利用国家重点实验室,广州,510275;南方医科大学基因工程研究所,广州,510515)

曾少灵,ZENG Shao-ling(中山大学生命科学学院,有害生物控制与资源利用国家重点实验室,广州,510275;深圳出入境检验检疫局动植中心,深圳,518010)

袁美妗,孙钒,庞义,YUAN Mei-jin,SUN Fan,PANG Yi(中山大学生命科学学院,有害生物控制与资源利用国家重点实验室,广州,510275) 

刊 名： 微生物学报  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA MICROBIOLOGICA SINICA  年，卷(期)： 2006 46(3)  分类号： Q78  关键词： 苏云金杆菌   辅助蛋白P19   晶体蛋白Cry11Aa   生物测定  

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