β淀粉样肽单克隆抗体可变区基因的5RACE扩增及序列分析

β淀粉样肽单克隆抗体可变区基因的5RACE扩增及序列分析

目的:克隆并分析抗β淀粉样肽单克隆抗体轻链与重链可变区基因.方法:从分泌抗β淀粉样肽单克隆抗体的杂交瘤细胞株A8中提取总RNA,根据恒定区序列设计基因特异性引物,通过5'RACE法扩增抗体的轻链和重链可变区基因,测定并分析可变区基因序列,并克隆入pMD18-T载体.结果:重链可变区基因序列全长450 bp,编码150个氨基酸残基;轻链可变区基因序列全长429 bp,编码143个氨基酸残基.在GeneBank中对氨基酸序列进行比对分析,二者均符合小鼠IgG可变区基因的特征.根据Kabat法则对A8抗体轻链和重链可变区氨基酸序列基因进行分析并确定了3个抗原互补决定区(CDR)、4个框架区(FR)和信号肽.结论:通过5'RACE法得到了抗β淀粉样肽单克隆抗体轻链与重链可变区基因,为进一步研究抗体三维结构,以及对该抗体进行人源化改造奠定了基础.

作 者： 王鑫 张莹 何金生 WANG Xin ZHANG Ying HE Jin-Sheng   作者单位： 北京交通大学,生物科学与技术研究所,北京,100044  刊 名： 生物技术通讯  ISTIC 英文刊名： LETTERS IN BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2010 21(2)  分类号： Q78  关键词： β淀粉样肽   单克隆抗体   可变区序列   5'RACE  

【β淀粉样肽单克隆抗体可变区基因的5RACE扩增及序列分析】相关文章：

人溶菌酶基因cDNA的克隆和序列分析04-26

奶山羊β-乳球蛋白基因5、3调控区的克隆和序列分析04-26

柞蚕Dsx基因的体外扩增04-27

虾夷扇贝β-actin基因的克隆和序列分析04-26

貉白介素-18(IL-18)基因的克隆及序列分析04-27

部分蔬菜CMV分离物CP基因的克隆及序列分析04-27

黄粉虫抗冻蛋白基因TmAFP84的克隆和序列分析04-26

稀有(鱼句)鲫(Rare gudgeon)Sox基因的克隆及序列分析04-26

饰纹姬蛙7个Sox基因的克隆及序列分析04-27

太湖新银鱼mtDNA COⅡ和Cytb基因的克隆与序列分析04-26