口服利福平海藻酸钠微球
１４８６
ＨｅｍｌｄｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅＶ０１．２６Ｎｏｔ２Ｄｅｃｅｍｂｅｒ２００７
口服利福平海藻酸钠微球的制备‘
王心静１，王巍１，黎立１，郑越２
（解放军总医院第二附属医院１．结核病研究所；２．药剂室，北京１０００９１）
［摘要】
目的研制口服利福平海藻酸钠微肆。方法采甩静电液滴法制备利福平海藻酸钠微球，滟Ｉ定粒径太
小、包封率、我药量厦其影响因素，考察微球的俸外释放特点。结果微球球形圆整，分散性好，平均粒径７０２¨ｍ，包封率８３．５％，栽药量１７１％，在模拟肠液中的释放呈快慢相，时间长而药物释放完全。结论以海藻酸钠、硬脂酸为材料，用静电液滴法制备利福平微球，珠径小、包封卓高、释药时间长．工艺简便。
［关键词】利福平；微球；海藻酸钠；硬脂醴［中图分类号］Ｒ９７８３；ＴＱ４６０
６
【文献标识码］Ａ
［文章编号］】∞４胛８ｌ（２００７）１２—１４８６＿０３
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近年来，药物缓释日益受到重视。微球成为良好器（郑州长城科工贸有限公司）。
１．２制备方法硬脂酸加热熔融，与利福平二甲基距砜溶液搅拌混合，搅拌条件下加进海藻酸钠溶液，倒人注射器，将静电场发生器正极与注射器尖端连接，负极
的缓释药物载体。天然高分子材料海藻酸钠具有良好
的稳定性和生物相容性，作为医药材料在人体的实际
应用。已经被药理学实验证明可行。海藻酸钠与钙离子接触时会瞬时凝胶化，可利用此特性对多种物质进行包埋，这一制备过程简单，避免有机溶剂．可以增加
与氯化钙溶液连接，在注射器推动力和电场力作用下，原料液滴人低温氯化钙（ｃａｃｌ：）溶液，迅速固化。形成
海藻酸钙凝胶微球，浸泡约２０ｍｉｎ后，蒸馏水清洗２
药物稳定性，降低药物在体内的副作用，延长药物疗效川。笔者研制了结核病治疗的一线药物——利福
平的口服海藻酸钠微球。报道如下。ｌ材料与方法
１．１
或３次，真空避光室温干燥１２
ｈ。
１．３微球粒径的测定取少量干燥微球置于载玻片上，加１％吐温８０溶液１滴，用滴管头仔细涂布均匀，
材料与仪器利福平（ＲＦＰ）、海藻酸钠（ＡＬ，中
小心加上盖玻片，将其置于光学显微镜下检测，分别记
录５个视野内的粒子数目和各种粒径大小共３００个，
等黏度）、硬脂酸（ｓＬ）、二甲亚砜均为分析纯，购自
ｓｉ舯ａ公司，氯化钙（分析纯，北京化工厂），甲醇（化学
纯，北京化工厂），高压静电液滴发生器（自制），
粒径分布按特定范围内的数目与总数目之比计算。
１．４包封率、载药量的测定精确称量一定质量的微球置于甲醇中，２５℃持续振摇加ｈ，用孔径０４５¨ｍ
ＢｅｃｋⅢａⅡＤｕ＿８００紫外可见分光光度仪，０ｌｖｍｐｕｓＢＨ光
学显微镜及ｃ＿３５ＡＤ照相系统．ｓａｒｔｏｎｕｓ
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精密电子分析天平，ｓｊＱ－７型数显直流无极调速搅拌
【收稿日期］２００７ｍ３．０８［基金项目］
金编号：０６２０５６）
微孔滤膜过滤后采用紫外分光光度法测定包封率，在
波长２５４ｎｍ处测其吸光度（＾值），按标准曲线法计算药物含量（ｃ），标准曲线方程为Ａ＝０．０３８
０．００４
６ｃ十
【修回日期］２００７—０４－１ｌ
’解放军总后勤部十一五课题资助项目（基
５（ｃ：峭?ｍＬ～，ｒ＝０９９４），线性范围：２—
［作者简介］王心静（１９７４一），女，北京人．主治医师，在读博士，研究方向：结核病的治疗。电话：ｏｌｏ一６６７７５９６９，Ｅ．
１８弘ｇ?ｍＬ～。
按下列公式计算包封率＝（Ｐ×ｃ）／占×１００％，载药量＝（ｙ×ｃ）／Ｄ×１００％，ｙ为溶解介质体积，ｃ为测
ｍａｉｌ：２ｈ印Ｐｙａｎｄｐｅａｃｅ＠鲫ｈｕ．㈣ｏ
万方数据
医药导报２００７年１２月第２６卷第１２期卷终
得的释放介质浓度，单位为斗ｇ?ｍＬ～，占实验中实际投入的利福平量，Ｄ为微球质量。
１．５体第一文库网外释放实验按《中华人民共和国药典》２０００
年版释放度测定法中的转篮法，溶出递质为盐酸（Ｈｃｌ）溶液（ｐＨ
１
２）和磷酸盐缓冲液（ｐＨ７．４）
ｌｏｏｍＬ，恒温搅拌，递质温度：（３７±０．１）℃，转速为１００ｒ－ｍｌｎ。在一定时间点上取样５ｍＬ，并加人
５
ｍＬ新鲜递质，取样用｝Ｌ径Ｏ．４５“ｍ微孔滤膜过滤，
用紫外分光光度法测定，按标准曲线法计算微球的累积释药量。重复３批样品，取平均值。２结果与讨论
２
ｌ制备工艺对微球粒径的影响微球的成球性良好，球形规整。使用静电液滴法制备微球，各实验条件在一定范围内对微球粒径影响较小。通过调整制备工艺的主要因素：电场的分布，液体流量电压及硬脂酸、海藻酸钠的比例等，可制得平均粒径（７０．２±４．３）¨皿的微球。
通过控制电场的分布、液体流量、电压等因素，可以缩小粒径，提高粒径的均一度。注射器锐孔至液面间距保持约３ｃｍ时，随着液面至烧杯口距离的减少，制备的微球粒径趋向均一。液面接近烧杯口减少了暴露的电极及烧杯四壁对电场分布的影响，一定程度上减步了子液滴的产生。而当液体流速较快或锐孔至液面间距过小时，液滴相互之间的距离较小，连续落人氯化钙溶液后形成的微球不易分散而粘连成絮状，不能充分的和钙离子发生凝胶化反应。而只有当电压大于一定值时，液体才会形成“锥一射流”的状态，得到粒径较小的单分散的微球，然而电压过大，液柱形成喷射，产生更多的子液滴”’３ｏ。实验结果提示电压为（１．５～２．０）ｘ１０４Ｖ时效果最好。
作为阻滞剂的硬脂酸可以有效地提高缓释性，但是静电液滴法必须保证液滴可以在氯化钙溶液中迅速沉降，如果硬脂酸比例过高，原料液液滴不能迅速向氯化钙溶液中沉降，在氯化钙溶液液面不能收缩成球体，在钙离子作用下，随即被固化成无定型凝胶。硬脂酸和利福平质量比ｌ：１时微球制作过程最顺利，对粒径的影响最小。
随着海藻酸钠的浓度增高，溶液的黏稠度亦增加，粒径范围增宽。实验结果提示为获得孔径＜１００灿Ⅲ粒径均一的微球，海藻酸钠浓度不宜）２％。
２２药物包封率的测定厦影响因素
２
２．１测定方法文献报道测定海藻酸钙凝胶微球
包封物的含量需要微球解聚，用磷酸盐、柠檬酸盐等缓冲液溶蚀微球后进行测定”’１。但是实验中发现，海
万
方数据?１４８７
藻酸与利福平的吸收峰相干扰。利福平易溶于甲醇。海藻酸钙不能溶于甲醇，硬脂酸微溶于甲醇，其与甲醇的酯化反应须在一定温度和催化剂存在的条件下才能发生”］。测定利福平和硬脂酸的甲醇溶液吸收峰，峰形和位置与利福平甲醇溶液的标准峰一致，而且微球经过甲醇浸泡振摇一定时间后再经磷酸盐缓冲液解聚测定，测不出利福平吸收峰。因此本实验测定方法具有良好的准确性和稳定性，而且操作简便。
２．２．２影响因素文献报道利福平等抗结核药的海藻酸钠微球和海藻酸钠－壳聚糖微球制备方法是海藻酸钠利福平混合物与钙离子交联，其包封率分别达到
７０％和８５％”’“。但是实验中笔者发现利福平很快释
放到钙溶液及之后的蒸馏水清洗液中，包封率只有６４．２％，但是加人一定比例的硬脂酸后包封率显著提
高（表１）。硬脂酸比例（僻／Ⅳ）增加，包封率提高，但
高硬脂酸比例影响微球制作和微球粒径，故选择利福平和硬脂酸质量比为１：１。
利福平与海藻酸钠的比例对包封率有一定的'影响，随海藻酸钠比例增高，一方面交联充分，另一方面形成的微球数量增多，包封率亦提高，但增加了微球的质量，使载药量逐渐降低。
海藻酸钠浓度不但影响微球粒径，对包封率亦有明显影响。海藻酸钠浓度＜２．５％之前包封率和载药量逐渐增大，之后随着海藻酸钠浓度的增大而减小。浓度太低，不能形成微球或微球机械强度低，不能有效包埋药物；浓度过高，黏度增大，喷制困难，微球变形，包埋效果不好。
海藻酸钠与Ｃａ２＋的交联时剐与微球的交联程度密切相关，而交联程度直接影响微球的包封率，时间过短，交联程度不够，不能形成“蛋箱”样结构的致密微球，微球强度不足，包封率低。时间过长，利福平向溶液中扩散损失增加，包封率下降，而且微球颜色发生变化，提示利福平被氧化。本实验提示２０ｍｉｎ交联时问效果良好，与ＰＡＮＤＹ等”１报道的８～ｌＯｍｉｎ有明显差别。见表ｌ，２。
表ｌ制备工艺对微球性状的影响
㈣号：鬻：篇平嚣桫载挚他≯
＾１１：Ｏｌ：ｌ７０Ｏ±３．５１７６“２
＾２１：１１：ｌ７３３±８７１Ｂ０７ｌ
３
Ａ３１：２ｌ：ｌ７６５±１７．２１８３７８２Ｂ１１：ｌｌ：３７０２±４３１７．１８３５Ｂ２
１：ｌ
ｌ：６
６８４±１０９
１５４
８６５
２．３药物体外释放性能见图１，显示在最优条件下制备的微球在盐酸和磷酸盐缓冲液的释放情况。利福
?１４８８
平在酸性条件下的释放比在碱性条件下慢得多，这是
海藻酸钙对不同ｐＨ值环境反应不同的结果。在酸性
环境中，海藻酸钙收缩，形成更紧密的网络结构，药物
主要通过扩散作用释放出来，速度缓慢。在碱性环境
中，钙离子与海藻酸交联解离，利福平呈现更快的释放行为。从体外释放的结果可以看出，药物在前４ｈ释放速度较快，随后呈现一个缓慢的释放过程。由此结果推测，一些药物可能吸附在微球的表面，或者以分子形式沉淀在微球的表面，表面药物溶出，产生了释放初期的突释现象；而更多的药物则是分散在载体骨架中，骨架材料的网状结构和硬脂酸阻滞剂的存在限制了药物的释放和扩散速率，使药物的释放呈现缓慢和持续性的特点。因此微球中利福平的释放是由快慢两部分
构成，这样既可保证短时间内有大量释药，也可维持有
一定量药物持续释放。由于海藻酸钙微球属于凝胶状颗粒，具有高孔隙率的结构”ｏ，结构较疏松，在碱性溶液的溶蚀作用下．微球解聚，其中药物释放完全。
样品编号嚣交黑问７
表２交联时间对包封率的影响
８＝三：包≯
ｌ２５１０ｌ：ｌ：３４２６２２５２０ｌ：ｌ：３８３５３
２５
３０
ｌ：ｌ：３
７９
３
∞加∞帅∞
０
１０
ＺＯ
３０
图ｌ不同情况下最佳配方微球累积释放率曲线围一◆一ＰＨ＝ｌ２；一●—ＰＨ＝７４；一▲一ｐＨ＝７４（无ｓＬ）
由图１可见，在有作为阻滞剂的硬脂酸存在的情
万
方数据Ｈｅｍｌｄ０ｆＭｅｄｉｃｉｎｅＶｏＬ２６Ｎｏ．１２Ｄｅｃｅｍｂｅｒ２００７
况下。利福平的释放明显减慢。这是由于利福平难溶于水，药物大部分存在于硬脂酸所形成的乳滴中，当载体与溶出介质接触时，由于脂溶性阻滞剂的存在，限制了药物的释放和扩散速度，因此随着硬脂酸用量增大，药物释放速度也逐渐减慢。
本实验利用静电液滴法制备了口服利福平海藻酸钠微球，平均粒径７０２“ｍ，包封率８３．５％，在模拟胃液中释放少，模拟肠液中释放时问长、药物释放完全。此工艺简便、高效．条件温和，化学污染少，生产周期短，可以推广至抗结核药物的改良，将有效提高结核病患者的药物依从性，减少复发和耐药的产生。
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５３（１）：１９３—２０１．
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海藻05-10