白曲霉斜面菌种培养条件的优化

时间：2021-11-03 16:29:09 资料我要投稿

白曲霉斜面菌种培养条件的优化

研究报告

中国酿造

２０１０年第９期总第２２２期

?９３?

白曲霉斜面菌种培养条件的优化

高林峰ｔ，汤庆莉?，吴天祥：?

（１．贵州大学化学与化工学院，贵州贵阳５５０００３；２．贵州大学生命科学学院，贵州责阳５５００２５）

摘要：对麸曲酱香白酒生产所需糖化酶菌种：白曲霉的一级种培养工艺条件进行单因素试验，应用Ｍｉｎｉｔａｂｌ５软件设计了Ｐｌａｃｋ－ｃ叶－ｔ－Ｂｕｒｎｌａｎ筛选试验，通过筛选得出蔗糖浓度、硫酸铵浓度、培养摹ｐＨ值以及微量元素配比为菌种生长的４个显著性影响因素，并对此进行正交试验得出白曲霉一级种斜面培养的最优条件为蔗糖浓度２５９／Ｌ，硫酸铵浓度３．５９／Ｌ，ＭｇＳＯ，?７Ｈ９９Ｋ２ＰＯ，１．０９／Ｌ，琼Ｊ］．１５９／Ｌ，ｐＨ值５．５，培养温度２８。Ｃ，菌体糖化酶活力７２４。８Ｕ／ｇ。关键词：白曲霉：斜面培养；工艺优化中图分类号：０９３－－３３５

文献标识码：Ａ

文章编号：０２５４—５０７１（２０１０）０９－００９３—０４

１．０９／Ｌ，ＫＣＩ！．０９／Ｌ，

ＯｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｏｆｓｌａｎｔｃｕｌｔｕｒｅｍｅｄｉｕｍｏｆｗｈｉｔｅＡｓｐｅｒＳｅ／ｍｓ

ＧＡＯＬｉｎｆｅｎ９１，Ｔａｎｇ

Ｑｉｎｇｌｉｌ，ＷＵＴｉａｎｘｉ蛆９２．

（１．ＳｃｈｏｏｌｏｆＣｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＣｈｅｍｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｇｕｉｚ凼ｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｌｙ，Ｇｕｉｙａｎ９５５０００３，Ｃｈｉｎａ；

２．Ｓｃｈｏｏｌｏｆｈ＇ｆｅｓｃＪｃｌＪＣＣ￥，Ｇｕｉｚｈｏｕ

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｐｌａｙｓ

ａｎ

Ｕｎｉｖｅｒｓｉ（ｙ，Ｇｕｉｙａｎｇ

５５００２５，国ｉｎａ）

ｉｍｐｏｒｔａｎｔｍｌｅｏｆｓａｃｃｈａｒｉｆｉｃａｆｉｏｎｉｎｔｈｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎｅｓｅｌｉｑｕｏｒ．Ｔｈｅｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｏｆｔｈｅｓｌａｎｔｃｕｌｔｕｒｅ

ｔｅｓｔ

ｍｅｄｉｕｎｗａｓｏｐｔｉｍｉｚｅｄｂｙｓｉｎｇｌｅ－ｆａｃｔｏｒｓ

ｉｎｔｈｉｓｓｔｕｄｙ．ＴｈｅＰｌａｅｋｅｔｔ－Ｂｕｒｍａｎ

ａｓ

ｅｘｐｅｒｉｍｃｍＷａＳｄｅｓｉｇｎｅｄｂｙｓｏｆｔｗａｒｅｏｆＭｉｒａ＇ｔａｂ１５．Ｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｆｏｒ－

ｍｅｎｔａｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｗｃｒｅｏｂｔａｉｎｅｄｂｙｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｄｅｓｉｇｎｆｏｌｌｏｗｅｄ：ｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｇｌｕｃｏｓｅ

２５班，ｔｈｅ

ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆａｍｍｏｎｉｕｍｓｕｌｆａｔｅ

ａｃ－

３．５叽，ＭｇＳＯ，－７Ｈ：，‘９１．０班，ＫＣｌ１．０叽Ｋ，ＰＯ（１．０班，ｍｅｄｉｕｍｐＨｖａｌｕｅ５．５

ｔｉｖｉｔｙｏｆｇｌｕｃｏａｍｙｌａｓｅｗａｓ７２４．８Ｕ／ｇ．

Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｗｈｉｔｅＡｓｐｅｒｇｉ．ｕｓ，ｓｌａｎｔｃｕｌｔｕｒｅ，ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ

ａｎｄｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ２８℃．Ｕｎｄｅｒｔｈｅｓｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，ｔｈｅ

酱香型白酒的传统生产工艺是以高温大曲为糖化发酵剂，以高粱为原料生产的。贵州茅台酒是其典型代表。但由于该工艺生产周期长、粮耗高、产量低资金周转慢、成本高。从而导致酱香型白酒市场价格相对偏高，不能满足不同层次消费的需求【”。应用纯种微生物制成麸曲，生产酱香型白酒，成为酱香型白酒生产的另一种途径，经研究其粮耗大幅下降、生产周期明显缩短，酒质基本达到大曲酱香的要求【习。麸曲白酒质量的优劣，取决于麸曲和酒母的质量这与选育菌种关系重大，要求麸曲应最大限度地将淀粉分解成可发酵性糖，应具有较高的淀粉酶及糖化酶的活力网。在酿酒工业中，生产麸曲白酒等酒类时白曲霉可作为糖化剂，这是因为白曲霉中的糖化酶可以将淀粉水解为葡萄糖，进而被微生物发酵产生酒精１４】，白曲霉斜面试管培养基的好坏可直接影响到酒质的优劣。因此本试验通过对白曲霉斜面试管培养基进行优化，以麸曲糖化

收稿日期：２０ＬＯ－０５．１１

酶的活力作为检测指标，探索白曲霉糖化酶活力最高时的培养条件。１材料与方法１．１菌种

白曲霉：购于四川微生物菌种保藏中心。１．２培养基

斜面培养基：葡萄糖３０９，ＮａＮ０３３９，ＭｇＳ０４?７Ｈ２０

ＫＣｌ

０．５９，

０。５９，Ｋ２Ｐ０４ｌｇ，琼脂１５９，蒸馏水１０００ｍＬ，ｐＨ值自然。固体培养基：２５０ｍＬ三角瓶装Ａ２５９含水率为６５％的

麸皮，恰好可以覆盖瓶底，０．１ＭＰａ灭菌３０ｍｉｎ。１．３培养方法

斜面培养：从活化好的母种试管中挑取黄豆大的菌丝块，接入斜面，在２８℃培养４ｄ。

固体培养：从斜面试管中挑取３块黄豆大小的菌丝块接入固体培养基，拌匀。培养温度为２８℃，刚开始为堆积培

基金项目：贵州省贵阳市科技局工业攻关项目（［２００９］筑科２合同字第１－０５７号）

作者简介：高林峰（１９８５－），男，山东济南人，硕士研究生，研究方向为发酵工程；吴天祥?，教授，通讯作者．

条件，均质为６０℃、３０ＭＰａ条件下均质２次，１２１℃杀菌５ｍｉｎ。经单因素试验及正交试验确定其最佳稳定剂配方为单甘酯０．２％，黄原胶０．０５％，羧甲基纤维素钠０．１２％，蔗糖酯０．１％。制得的产品流体均一，色泽乳白，可稳定保存。经过上述工艺加工的巴旦木蛋白饮料符合国家饮料生产标准，保质期可达１２个月。

参考文献：

【１】朱京琳．新疆巴旦杏ｒＭ】．乌鲁木齐：新疆人民出版社，１９８４．

【２］刘金荣，但建明，江发寿，等．巴旦杏仁的营养成分与理化常数测定，

营养学报阴．２００２，２４（２）：２０２．２０３．

【３】郑力．巴旦杏仁乳饮料的品质改良研究啊．粮油食品科技，２００６，４：

３８－３９．

【４】高愿军．软饮料加工技术【Ｍ】．北京：化学工业出版社，２００７．

万方数据

２０１０ＮＯ．９

?９４?

ＳｅｒｉａｌＮｏ．２２２

ＣｈｉｎａＢｒｅｗｉｎｇ

养，２０ｈ后将培养基混匀平摊在瓶底，２４ｈ后培养结束。１．４检测方法

１．４．１糖化酶的测定方法嗍

（１）麸曲液的制备：称取５９麸曲，加入１００ｍＬ蒸馏水浸泡ｌｈ。

（２）取Ａ、Ｂ２个三角瓶，Ａ瓶加入２０ｍＬ蒸馏水，Ｂ瓶加入２０ｍＬ２％淀粉溶液（准确称取绝干的可溶性淀粉２９，用

少量的水调匀，倒入７０ｍＬ的沸水中，并用２０ｍＬ水反复洗涤小烧杯，洗液合并其中，用微火煮沸到透明，冷却后用水定容至１００ｍＬ，当天配制使用）。

（３）向Ａ、Ｂ２个三角瓶中各力ｇＸＳｍＬ、ｐＨ４．６７，酸一乙酸钠缓冲液（２ｍｏｌ／Ｌ乙酸溶液：取１１８ｍＬ冰乙酸用水稀释至１Ｌ，与２ｍｏＶＬ乙酸钠溶液：称取２７２９乙酸钠溶于水并稀释至ｌＬ，等体积混合即可），然后分别加入５ｍＬ浸泡好的麸曲液。

（４）置于３０℃水浴锅反应６０ｍｉｎ后加入３ｍＬｌｍｏｌ／ＬＮａＯＨ终止反应。

（５）取２个新的三角瓶Ｃ、Ｄ盼别加入斐林甲一乙液各５ｍＬ，

从反应后的Ａ、Ｂ２瓶中各取５ｍＬ力ｎ入，在电炉上加热。在沸腾条件下用ｌｇ／Ｌ葡萄糖溶液进行滴定，直至蓝色消失记录所用葡萄糖液的体积Ｖ。、Ｖ：。

（６）糖化酶活力（Ｕ，妒＝（Ｖ。．Ｗｘ９６

１．４．２培养条件优化

对碳源、氮源的选定以及对选定后的碳源、氮源的质量浓度、微量元素配比、培养时间和培养基Ｐｈ值进行单因素试验。利用Ｍｉｎｉｔａｂｌ５软件设计了５因素２水平的Ｐｌａｃｋ－ｅｔｔ－Ｂｕｒｍａｎ筛选试验，从中找出对菌体生长的显著性因素并进行正交试验对其优化。２结果与讨论２．１单因素试验２．１．１碳源、氮源的选择

（１）碳源的选择：分别用３０９／Ｌｌ｝勺蔗糖、麦芽糖、可溶性淀粉、玉米粉来代替基础培养基中的葡萄糖，其他条件均不变进行试验，结果见图１。

６００

蚕５００

ｏ４００

杂３００

蜒

避２００

＿

糖１００

Ｏ

ｆ－淀粉蔗糖葡萄糖麦芽糖玉米粉

圈一圈－Ｌ．－圈．－１－一＿．１－．Ｉ．Ｊ

碳源

图１

不同碳源对菌体糖化酶活力的影响

Ｆｉｇｕｒｅ１．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃａｒｂｏｎ

ｓｏｕｒｃｅｏｎ

ｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｓａｃｃｈａｒｉｆｙｉｎｇ

ｅｎｚｙｍｅ

万方数据

碳源是白曲霉乃至任何微生物生长能量代谢的'来源，不同的碳源对菌体生长均有不同的影响，由图ｌ可以明显看出，蔗糖对菌种产糖化酶的影响最大，而且蔗糖的价格适宜，故选蔗糖作为斜面培养的碳源。

（２）氮源的选择：用３班的尿素、碳酸氢铵、酵母膏、硫

酸铵和蛋白胨来代替基础培养基中的硝酸钠，其他条件不变进行试验，结果见图２。

５

４４

３３２

●●

硝酸钠尿素碳酸氡铵酵母臂蛋白胨硫酸铵

氮源的种类

图２不同氮源对菌体糖化酶活力的影响

Ｆｉｇｕｒｅ２．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｎｉｔｒｏｇｅｎ

ｓｏｕｒｃｅｏｎｔｈｅａｃｔｉｖｎｙｏｆ

ｓａｃｃｈａｒｉｉｙｉｎｇｅｎｚｙｍｅ

氮源是构成菌体成分的主要物质，不同的氮源对菌体的生长及糖化酶的活力的影响也不一样。由图２可以明显看出，白曲霉对酵母膏和硫酸铵的利用率较高，并且考虑到经济因素以及试验操作的因素，故选择硫酸铵作为菌种斜面培养的最佳氮源。取１０鲫卜Ｓ０９／Ｌ不同浓度的蔗糖加入到斜面培养基当中，其他的条件保持不变，观察对菌体生长的影响，试验结果（图３）可以明显看出，白曲霉产糖化酶活力随糖浓度的增加而增加，当蔗糖浓度为３０９／Ｌ时达到最佳。

７００

玉６００

ｏ

５００

、４００

Ｒ

蜒３００

塞２００

囊１００

蔗糖浓度“ｇ?Ｌ‘‘）

图３蔗糖浓度对菌体生长的影响

Ｆｉｇｕｒｅ

３．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｓｕｃｒｏｓｅｏｒｌ

ｔｈｅａｃｔｉｖｎｙｏｆｓａｃｃｈａｒｉｆｙｉｎｇｅｎｚｙｍｅ

取ｌｇ／Ｉ一５９／Ｌ不同浓度的硫酸铵ｔＪｎＡ，斜面培养基当中，其他条件保持不变，观察对菌体生长的影响，试验结果（图４）可以明显看出，白曲霉产糖化酶的活力随硫酸铵的浓度增加而增加，当硫酸铵的浓度为３９／Ｌ时达到最佳。

２．１．２碳源浓度对菌体生长的影响

２．１．３氮源浓度对茵体生长的影响

中国酿造

２０１０年第９期研究报告

ｆ

ｂｏ

●

√

）长蛭避ｇ耀

硫酸铵浓度／（ｇ?Ｌ。）

图４硫酸铵浓度对菌体生长的影响

Ｆｉｇｕｒｅ４．Ｅｆｆｅｃｔｏｆａｍｍｏｎｉｕｍｓｕｌｆａｔｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ

ｏｌｌ

ｔｈｅ

ａｃｔ脯ｙ

ｏｆ

ｓａｃｃｈａｄｆｙｉｎｇｅｎｚｙｍｅ

微生物的生长都需要在适宜的酸碱环境下，调节培养基的ｐＨ值为４、５、６、７、８，其他条件保持不变，观察对菌体生长的影响，结果（图５）可以明显看出，在ｐＨ值为６时菌体糖化酶的活力最高，故选择培养基的ｐＨ值为６。

ｏ

ｋ

●

ｏ

、－，

Ｒ蜒潼基瓣

ｐＨ值

图５

ｐＨ值对菌体生长的影响

Ｆｉｇｕｒｅ５．ＥｆｆｅｃｔｏｆｐＨｖａｌｕｅｏＮ

ｔｈｅａｃｔｉｖｎｙｏｆｓａｃｃｈａｒｉｆｙｉｎｇｅｎｚｙｍｅ

２．１．５培养时间对菌体生长的影响

ｏ

ｈ

●

ｏ

—Ｒ蜒滋Ｓ舞

培养时间／ｄ

图６培养时间对菌体生长的影响

Ｆｉｇｕｒｅ６．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｃｕｌｔｕｒｅｔｉｍｅ

ｏｌｌ

ｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｓａｃｃｈａｒｉｆｙｉｎｇ

ｅｎｚｙｍｅ

分别选择２ｄ√ｏｄ作为培养时间，通过检测糖化酶活力的大小来确定培养时间，结果（图６）可以看出，随时间的高，但随后随着菌体的老化糖化酶的活力逐渐降低，故选

万方数据

总第２２２期

?９５－

择４．５ｄ为培养时间。

２．１．６微量元素配比对菌体糖化酶活力的影响

Ｍｇ、Ｋ、Ｐ元素作为培养基中的微量元素，虽然需要的量很少但是对微生物来讲却也是必不可少的。试验将ＭｇＳ０４、ＫＨ２ＰＯ，按照ｌ：ｌ、１：２、ｌ：３的比例进行组合，试验结果（图７）可以看出，当ＭｇＳＯ。：Ｋ．Ｈ：Ｐ０３为１：ｌ且均为１．０９／Ｌ时糖化酶的活力最高。

５００

０．５＋０．５０．５＋１．０Ｏ．５＋１．５１．ｏ十１．０１．ｏ＋２，０１．ｏ＋３．０

ＭｇＳ０４＋ＫＨ２ＰＯｄ（ｇ?Ｅ。）

图７微量元素配比对菌体生长的影响

７．Ｅｆｆｅｃｔｏｆ

ｔｒａｃｅ

ｅｌｅｍｅｎｔｒａｔｉｏｓ０１１

ｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｓａｃｃｈａｒｉｆｙｉｎｇ

ｅｎｚｙｍｅ

表１各因素所选水平

Ｔａｂｌｅ１．ＳｅｌｅｃｔｅｄＩｅｖｅＩｓ‘

ｏｆｖａｒｉｏｕｓｆａｃｔｏｒｓ

水平擀参搿群Ｌ篱－州值搋

”。

度／（ｇ?Ｌ．１）

问／ｄ

度／（ｇ?１）

Ｐ１１咀索配比

高水平（１）

３５４

４．５

６．５

１．２５：１．２５

低水平（．Ｉ）

２５

表２Ｐｌａｃｋｅｔｔ－Ｂｕｒｍａｎ设计矩阵及试验结果

Ｔａｂｌｅ２．ＤｅｓｉｇｎｍａｔｒｉｘｏｆＰｌａｃｋｅｔｔ－Ｂｕｒｍａｎａｎｄｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｒｅｓｕｌｔｓ

试验号

蒙藿

培养时间ｐＨ

微差鼋素‘焉繁ｖ／（ｕ．ｇ．１）

．．

１

Ｉ

－

５

●２．

．

９３４５

－

；１

－

５

．

ｉ

＿

３－

ｌｌ

８６１１．

１６

７＿

ｌｌ

．

ｌ８．ｌ

－

ｌ－－

１－

９

－ｌ

ｌ

－

ｉ｝６５８ｍ

－－●

ｎ抡

－

；

－

ｉ

．

；ｌｌｌ

ｉ

ｌ１

ｌ

试验根据碳源浓度、氦源浓度、培养基ｐＨ值、培养时间和微量元素配比的单因素试验结果，设计了ｎ＝１２的２．１．４培养基ｐＨ值对菌体生长的影响

Ｆｉｇｕｒｅ２．２显著性因素的筛选

Ｐｌａｃｋｅｔｔ－Ｂｕｒｍａｎ筛选试验，每个因子取高“１）低（．１）２个水平（例如培养基ｐＨ值为６时最高，取高水平为６．５，低水平为５．５）。以糖化酶的活力大小为响应面的Ｙ值，试验因素水平见表ｌ，结果见表２，各因素的效应评价及系数估计见表

增加糖化酶的活力逐渐的升高，当４．５ｄ时糖化酶的活力最

２０１０Ｎｏ．９

?９６?

ＳｅｒｉａｌＮｏ．２２２

ＣｈｉｎａＢｒｅｗｉｎｇ

Ｒｅｓｅａｒｃｈ３。若ｐ＜Ｏ．０５说明该因素是显著性因素，对菌体的生长有着显著性的效果。由表３可以明显的看出，除了培养时间以外，蔗糖浓度、ｐＨ值、微量元素配比和硫酸铵浓度均对菌体生长有显著性影响。

裹３各因素效应与系数估计

Ｔａｂｌｅ３．Ｆａｃｔｏｒｅｆｆｅｃｔａｎｄｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ

２．３正交试验分析

根据显著性试验筛选出的４种显著性因子进行正交试验分析，试验采用的是ｋ（３０正交试验，各因素选取水平见表４，试验结果及分析见表５，方差分析见表６。

表４优化菌体生长条件正交试验因素水平

Ｔａｂｌｅ４．ＬｏｖｏＩｓｏｆｖａｒｉｏｕｓｆａｃｔｏｒｓｏｆｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｔｅｓｔ

水平”。

Ａ孳蔓？粤ｃ（ｇ?Ｌ１）

Ｂ硫甓孽饕度／（２?Ｌ’‘）

。ｐ１８ｐＨ值Ｄ微量元素配比。”５“８““ｌ２５３．５５．５０．７５：０．７５２３０４６１．００：１．ｏｏ３

３５

４．５

６．５

１．２５：１．２５

表５优化菌体生长条件正交试验数据及结果分析

Ｔａｂｌｅ

５．Ｒｅｓｕｌｔｓａｎｄａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ试验号

ＡＢ

ＣＤ糖化酶活力／（Ｕ?ｇ－１）

ｌｌ１

ｌｌ５３４２１．２２２５１８３ｌ’３３３５０９４２ｌ２３４８０５２２３ｌ４７０６２３’１２４７９７３ｌ３２４６１８３２ｌ３４３７９

３３２ｌ４４３

均值ｌ５２０．３３３４９１．６６７４８３．３３３４８２．３３３均值２４７６．３３３４７５．０００４８０．３３３４８６．０００均值３４４７．３３３４７７．０００４８０．３３３４７５．３３３极差

７３．０００

１６．６６７

３．３３３

１０．６６７

由正交试验结果可以看出，对菌体生长的最大因素为蔗糖的浓度，其次为微量元素配比培养基ｐＨ值及硫酸铵浓度。４个因素的最佳组合应该是Ａ。Ｂ．Ｃ。Ｄ：，即蔗糖浓度为２５９／Ｌ，硫酸铵浓度为３．５９／Ｌ，ＭｇＳ０４?７Ｈ２０１．ｏ＃－，ＫＣＩ１．０９／Ｌ，Ｋ２Ｐ０４１．０９／Ｌ琼脂ｌＳｇ／Ｌ，ｐＨ值为５．５。按照所得出的

万方数据

Ｒｅｐｏｒｔ

培养基最佳组合进行试验，并取２个水平，计算其平均值，最后得到菌体糖化酶的活力为７２４．８Ｕ／ｇ。

褒６正交试验方差分析

Ｔａｂｌｅ６．Ｖａｒｉａｎｃｅ

ａｎａｌｙｓＩｓｏｆｈｅｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ

３结果分析

传统的大曲酱香型白酒生产，工艺复杂，生产周期长，

耗粮高，对自然气候条件要求奇刻。近年来，发展较快的麸曲酱香型酒生产工艺，具有简化工艺、降低消耗，缩短周期的特点使得纯种麸曲发酵为酱香型白酒发展的新途径嘲。白曲霉为麸曲发酵的糖化剂，可以将原料中的淀粉分解成菌体生长所需要的糖，其糖化酶的活力大小对麸曲白酒的产酒率以及白酒的质量有着重要的影响，因此本实验以糖化酶的活力大小作为验证菌体生长好坏的考察指标。

通过单因素试验对自曲霉斜面培养基成分及培养条件进行优化，确定蔗糖为培养基碳源，硫酸铵为培养基氮源。通过Ｐｌａｃｋｅｔｔ－Ｂｕｒｍａｎ筛选试验对蔗糖浓度、硫酸铵浓度、培养时间、培养基ｐＨ值、微量元素配比进行筛选确定蔗糖浓度、硫酸铵浓度、培养基ｐＨ值、微量元素配比为菌种生长的显著性因素。

对４组显著性因素进行Ｌ９（３４）进行正交试验，得到菌体生长培养条件的最佳配比为蔗糖浓度为３０９／Ｌ，硫酸铵浓度为３．Ｓｇ／Ｌ，ＭｇＳ０４?７Ｈ２０

１．０９／Ｌ，ＫＣＩ１．０９／Ｌ，Ｋ２Ｐ０４

１．０９／Ｌ，琼）指１５９／Ｌ，ｐＨ值为５．５。在此培养条件下进行培养可以明显的提高茵体糖化酶的活力，活力值可以达到７２４．８Ｕ／ｇ。完全符合白曲霉作为发酵糖化剂的作用，对以后麸曲白酒的发酵产酒具有指导意义。参考文献：

【ｌ】赵希玉，王晓风．用麸曲法生产酱香型白酒工艺研究叨．酿酒，２００３

‘

（７）：２９－３０．

【２】时卫平．新型酱香型白酒的生产叨．酿酒科技，２００５（８）：５４－５５．【３】熊子书．麸曲白酒优良菌种的选育【Ｊ】．酿酒科技，１９９８（１）：１５．１６．【４】张娇英，孙学嘉。彭仁清。等．白曲霉一级种培养基的筛选【Ｊ】．佳木斯大

学学报：自然科学版，２００５（１０）：６７１－６７３．

【５】栗永清，赵玉培，徐加顺．大曲、麸曲相结合生产酱香型白酒佣．酿酒，

１９９３（２）：３８．３９．

【白曲霉斜面菌种培养条件的优化】相关文章：