富勒烯-蛋氨酸衍生物对PC12细胞氧化损伤的保护作用

富勒烯-蛋氨酸衍生物对PC12细胞氧化损伤的保护作用

摘要： 目的 利用有机合成方法制备出一种具有良好水溶性的C60-蛋氨酸衍生物(FMD),并研究其对自由基的清除能力及对过氧化氢诱导的PC12细胞氧化损伤的保护作用.方法 利用亲核加成机制合成了C60-蛋氨酸衍生物,并用FT-IR、1HNMR等手段对该衍生物进行了表征.将不同浓度的FMD加入邻苯三酚-鲁米诺(PA-L)自氧化发光体系和邻菲罗啉发光体系,观察FMD对发光强度的抑制作用;体外培养PC12细胞株,在培养液中预先加入不同浓度的FMD后,以500μmol/L H2O2诱导PC12损伤,通过MTT比色法观察不同浓度FMD作用下PC12的存活情况,用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,采用单细胞凝胶电泳法测定DNA单链损伤,化学比色法检测胞内外MDA含量和SOD活性,荧光法检测进入胞内FMD的量.结果 化学发光试验表明:其浓度达到1mg/ml时,对超氧阴离子和羟自由基的抑制率分别达到83.6%和90.5%,对两种活性氧的半抑制浓度(IC50)分别为0.195和0.250mg/ml.检测反映自由基损伤的指标MDA和SOD,与正常组相比,损伤组PC12细胞胞内及培养液中MDA含量明显增加,而SOD活性显著降低;FMD可显著降低MDA水平并提高PC12细胞内及培养基中SOD活性.结论 FMD对氧自由基、羟自由基等ROS具有很好的清除作用,并对过氧化氢诱导的PC12损伤具有良好的保护作用. 作 者： 沈杰    陈田    张金龙    杨丽霞    郑莉    徐顺清    Shen Jie    Chen Tian    Zhang Jinlong    Yang Lixia    Zhen Li    Xu Shunqing   作者单位： 沈杰,陈田,杨丽霞,郑莉,徐顺清,Shen Jie,Chen Tian,Yang Lixia,Zhen Li,Xu Shunqing(华中科技大学同济医学院公卫学院环医所,武汉,430030)

张金龙,Zhang Jinlong(华中科技大学化学与化工学院高分子实验室,武汉,430074) 

期 刊： 医学研究杂志  ISTIC   Journal： JOURNAL OF MEDICAL REASERCH  年，卷(期)： 2010, 39(11)  分类号：   关键词： 富勒烯-蛋氨酸衍生物(FMD)    PC12    氧化损伤    保护   

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