枫香ISSR-PCR扩增条件的优化

枫香ISSR-PCR扩增条件的优化

对浙江省天台山枫香自然种群的DNA进行提取和ISSR-PCR扩增条件的优化.分析了Mg2+浓度、4×dNTP浓度、BSA浓度、模板DNA用量、引物用量、Taq DNA聚合酶用量等对反应结果的影响.建立了适用于枫香ISSR分析最适宜的反应体系:10 μl PCR反应体积中,1 × Taq酶配套缓冲液(10 mmol·L-1 Tris-HCl,pH值9.0,50 mmol·L-1 KCl,0.1%TritonX-100),2.0 mmol·L-1 Mg2+,0.15 mmol·L-1 4×dNTP,2 mg·mL-1 BSA,10 ng模板DNA,6 pmol引物,0.9 U Taq DNA聚合酶,引物UBC808的最适退火温度为52.4℃.用此反应体系对天台山枫香自然种群进行了遗传多样性分析,结果显示其多态位点百分率为84.26%,Nei指数为0.2665,Shannon信息指数为0.4044,其遗传多样性处于较高水平.

作 者： 毕泉鑫 金则新 曾志成 叶文国 李建辉 BI Quan-xin JIN Ze-xin ZENG Zhi-cheng YE Wen-guo LI Jian-hui   作者单位： 毕泉鑫,金则新,曾志成,李建辉,BI Quan-xin,JIN Ze-xin,ZENG Zhi-cheng,LI Jian-hui(台州学院生态研究所,浙江,临海,317000)

叶文国,YE Wen-guo(天台县林业局,浙江,天台,317200) 

刊 名： 福建林业科技  PKU 英文刊名： JOURNAL OF FUJIAN FORESTRY SCIENCE AND TECHNOLOGY  年，卷(期)： 2008 35(1)  分类号： Q943  关键词： 枫香   ISSR   优化   遗传多样性  

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