人cubilin蛋白功能片段原核表达系统的建立

人cubilin蛋白功能片段原核表达系统的建立

目的构建编码白蛋白吞饮受体人cubilin(hcubilin)蛋白配体结合域CUB7-8基因片段的原核表达载体,诱导表达并鉴定表达产物.方法重组DNA技术构建原核表达载体pGEX-hCUB7-8,IPTG诱导表达,SDS-PAGE与免疫印迹法鉴定表达产物,Pull down实验验证融合蛋白是否与白蛋白结合.结果双酶切和测序鉴定表明CUB7-8片段插入正确,诱导表达后获得分子量为52×103的融合蛋白,该融合蛋白可以被抗GST抗体识别,并且可以和白蛋白结合.结论CUB7-8基因片段编码的蛋白质能在原核细胞中正确表达,并且可以和白蛋白结合,这为进一步研究该功能域的结构与功能奠定了基础.

作 者： 李新伦 何娅妮 杨聚荣 梁海君 林静 李开龙 丁涵露 张建国 LI Xin-lun HE Ya-ni YANG Ju-rong LIANG Hai-jun LIN Jing LI Kai-long DING Han-lu ZHANG Jian-guo   作者单位： 第三军医大学大坪医院野战外科研究所肾内科,重庆,400042  刊 名： 第三军医大学学报  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE  年，卷(期)： 2006 28(10)  分类号： Q51 Q591.2 Q75  关键词： cubilin   pGEX-4T-1   融合蛋白   白蛋白  

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