纤维蛋白肽与低分子量尿激酶原融合蛋白的构建及性质

时间:2023-04-29 00:45:35 生物医学论文 我要投稿
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纤维蛋白肽与低分子量尿激酶原融合蛋白的构建及性质

将人工合成的寡核苷酸片段进行定向连接后,得到编码纤维蛋白p链N端(p 15~42)多肽的基因片段及连接区片段(linker),再与低分子量尿激酶原(scuPA-32k)cDNA分子进一步连接后,得到了Fβ(15~42)/scuPA-32k的融合基因.在大肠杆菌中经过IPTG诱导表达,经过变性及复性,Zn2+螯合层析及SephacrylS200凝胶层析后,目的蛋白被纯化.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)显示为一条蛋白质纯化条带,分子质量为35 ku.经纤维蛋白平板法测定比活为87000 U/mg.经纤溶酶活化后的融合蛋白与低分子量尿激酶相比,对显色底物S2444酶促动力学性质相似.同时Fβ(15~42)/scuPA-32k具有较高的纤维蛋白的亲和性并能抑制纤维蛋白凝块的形成.

作 者: 焦建伟 刘宁 俞梅敏 茹炳根   作者单位: 北京大学生命科学学院,蛋白质工程国家重点实验室,北京,100871  刊 名: 生物化学与生物物理进展  ISTIC SCI PKU 英文刊名: PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS  年,卷(期): 2001 28(6)  分类号: Q71  关键词: 低分子量单链尿激酶原   纤维蛋白肽   融合  

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