微绿球藻DNA质粒文库的构建

微绿球藻DNA质粒文库的构建

微绿球藻(Nannochloropsis oculata)DNA被提取纯化并经超声波处理后,将所得大小在1.6～3 kb之间的DNA片段用T4 DNA聚合酶补平,再与Sma Ⅰ酶切消化并经去磷酸化处理的质粒载体pUC18连接,转化至DH10B大肠杆菌(Escherichia coli)的感受态细胞中.建立的DNA质粒文库容量含2×104个克隆,其中重组子占90%.随机挑选白色菌落并培养,抽提的质粒经Xba Ⅰ和Sac Ⅰ双酶切鉴定,显示重组的质粒中均含有大小不等的DNA插入片段.

作 者： 赵大显 周志刚 ZHAO Da-xian ZHOU Zhi-gang   作者单位： 上海水产大学,农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室,生命科学与技术学院,上海,200090  刊 名： 海洋科学  ISTIC PKU 英文刊名： MARINE SCIENCES  年，卷(期)： 2006 30(5)  分类号： Q78  关键词： 微绿球藻(Nannochloropsis oculata)   超声处理   质粒载体pUC18   DNA文库  

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