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全合成人源性噬菌体抗体库的构建
目的:构建全合成人源性噬菌体抗体库.方法:选择部分使用频率较高的人抗体胚系基因家族的框架区基因进行人工合成,同时人工设计合成半随机CDR3,通过重叠拼接延伸PCR的方法合成抗体基因.然后利用限制性内切酶SfiⅠ、NotⅠ分别双酶切抗体基因和噬菌体展示载体.连接后的重组噬粒通过电击转化的方法转入大肠杆菌TG1,构建抗体库.结果与结论:PCR结果显示,通过优化后的方法能在保证抗体库多样性的前提下,高效地获得抗体基因.经过数十次电击转化构建了库容量为2×109的全合成抗体库,菌落PCR、测序及筛选结果表明,抗体库质量优良,为筛选人源性治疗抗体奠定了基础.
作 者: 杜威世 王双 孙志伟 俞炜源 DU Wei-Shi WANG-Shuang SUN Zhi-Wei YU Wei-Yuan 作者单位: 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071 刊 名: 军事医学科学院院刊 ISTIC PKU 英文刊名: BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES 年,卷(期): 2006 30(4) 分类号: Q782 关键词: 噬菌体展示 全合成抗体库 单链抗体【全合成人源性噬菌体抗体库的构建】相关文章:
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