根癌农杆菌介导的百脉根遗传转化体系的优化研究

根癌农杆菌介导的百脉根遗传转化体系的优化研究

百脉根(Lotus corniculatus L.)是世界著名的多年生优良豆科牧草之一,也是常见的庭院观赏植物.本文通过比较不同根癌农杆菌转化百脉根的效率和优化百脉根子叶遗传转化的条件,建立了一套有效的遗传转化体系.实验结果表明,EHA105作为宿主菌对百脉根进行转化较LBA4404和GV3101具有更高的转化率;5 d苗龄的子叶最适合作为转化的外植体;浸染过程中0.05 MPa负压处理5 mim以及在共培养培养基中添加20 mg/L的乙酰丁香酮均可提高转化效率.卡那霉素抗性植株经3次选择继代培养后,PCR检测全部为阳性.对部分PCR阳性植株进行PCR-Southern杂交,证实PCR产物真实可靠,表明外源基因已整合进入百脉根基因组中.

作 者： 孙艳香 杨红梅 耿云红 朱晔荣 王宁宁 王勇 Sun Yanxiang Yang Hongmei Geng Yunhong Zhu Yerong Wang Ningning Wang Yong   作者单位： 孙艳香,Sun Yanxiang(南开大学,生命科学学院,天津,300071;河北廊坊师范学院,生物系,河北,廊坊,060051)

杨红梅,耿云红,朱晔荣,王宁宁,Yang Hongmei,Geng Yunhong,Zhu Yerong,Wang Ningning(南开大学,生命科学学院,天津,300071)

王勇,Wang Yong(南开大学,生命科学学院,天津,300071;天津市农业生物技术研究中心,天津,300192) 

刊 名： 南开大学学报（自然科学版）  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS NANKAIENSIS(NATURAL SCIENCE EDITION)  年，卷(期)： 2006 39(2)  分类号： Q78  关键词： 百脉根   根癌农杆菌   遗传转化   苗龄   AS   负压处理  

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