通用型奶牛多位点基因打靶载体系统的构建

通用型奶牛多位点基因打靶载体系统的构建

以奶牛为研究对象,以其重复的rRNA基因间的间隔序列为靶位点,基于BAC重组酶系统构建多位点基因打靶载体,为建立体内多位点基因打靶技术获得关键材料.首先构建BAC-TDN筛选载体,然后构建pYLVS-GD表达载体.将BAC-TDN筛选载体和pYLVS-GD表达载体共转化至大肠杆菌NS3529中,通过Cre重组酶的作用形成BAC-TDN-VS-GD质粒,采用归位内切酶I-Sce Ⅰ切除pYLVS载体骨架,构建奶牛多位点基因打靶载体BAC-TDN-GD,利用接头LS使之环化.BAC-TDN-GD打靶载体与pYLSV质粒组成了通用型奶牛多位点打靶载体系统.以重复序列为靶位点的多位点基因打靶技术,将部分解决目前存在的打靶效率低、安全性差等问题.

作 者： 蒋泓 唐冬生 李月琴 张欣 李芳 胥斯卡 周天鸿 JIANG Hong TANG Dong-sheng LI Yue-qin ZHANG Xin LI Fang XU Si-ka ZHOU Tian-hong   作者单位： 蒋泓,李月琴,张欣,胥斯卡,周天鸿,JIANG Hong,LI Yue-qin,ZHANG Xin,XU Si-ka,ZHOU Tian-hong(暨南大学生物工程学系,广东,广州,510632)

唐冬生,TANG Dong-sheng(暨南大学生物工程学系,广东,广州,510632;佛山科学技术学院医学院,广东,佛山,528000)

李芳,LI Fang(佛山科学技术学院医学院,广东,佛山,528000) 

刊 名： 暨南大学学报（自然科学与医学版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF JINAN UNIVERSITY（NATURAL SCIENCE & MEDICINE EDITION）  年，卷(期)： 2006 27(3)  分类号： Q782  关键词： 基因打靶   多位点   细菌人工染色体   重组酶系统   奶牛   重复序列  

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