改良手工显微切割法获取特定细胞提取高质量RNA

改良手工显微切割法获取特定细胞提取高质量RNA

探讨显微切割过程中有效保持RNA完整性的组织固定方法,建立一种简易的手工显微切割法.应用自制"T形板"辅助冰冻切片,100%无水乙醇一次性脱水固定,"排除切割法"获取目的细胞,用TRIzol提取RNA,琼脂糖凝胶电泳和RT-PCR分析RNA质量."一步法"固定可长时间保存RNA的完整性;从食管癌标本5个特定阶段的细胞中提取的RNA,经电泳和RT-PCR分析均具有较高的质量.无水乙醇"一步法"固定,在显微切割的过程中可有效保持RNA的完整性;T形板和"排除切割法"简化了手工显微切割的操作,提取的RNA质、量均可满足后续分子水平研究的需要.

作 者： 周广彪 胡盛平 刘静文 张可浩 官兵 吴名耀 沈忠英 杨捷生 ZHOU Guang-Biao HU Sheng-Ping LIU Jing-Wen ZHANG Ke-Hao GUAN Bing WU Ming-Yao SHEN Zhong-Ying YANG Jie-Sheng   作者单位： 周广彪,胡盛平,刘静文,张可浩,官兵,ZHOU Guang-Biao,HU Sheng-Ping,LIU Jing-Wen,ZHANG Ke-Hao,GUAN Bing(汕头大学医学院,分子生物学中心,汕头,515031)

吴名耀,沈忠英,WU Ming-Yao,SHEN Zhong-Ying(汕头大学医学院,病理学教研室,汕头,515031)

杨捷生,YANG Jie-Sheng(汕头大学医学院,肿瘤医院胸外科,汕头,515031) 

刊 名： 中国生物化学与分子生物学报  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY  年，卷(期)： 2006 22(3)  分类号： Q522.2  关键词： 食管癌   组织固定   显微切割   RNA提取  

【改良手工显微切割法获取特定细胞提取高质量RNA】相关文章：

活性污泥高质量总RNA提取的一种有效方法04-26

用改良CsCl密度梯度离心法提取石蒜叶片和鳞茎总RNA04-27

何首乌总RNA提取方法的比较及改进04-26

细胞内DNA和RNA显色反应的改进04-26

RNA干扰介导原核细胞适应性免疫04-27

野生桃幼叶DNA提取方法的改良研究04-27

绿海龟外周血细胞显微结构与分类04-27

定量RT-PCR中人干细胞因子的RNA-CRS的构建04-26

中华绒螯蟹胸神经团神经分泌细胞的显微和超显微结构观察04-26

兔骨髓间充质干细胞获取与特性的实验研究04-26