人类原始生殖细胞的体外培养

人类原始生殖细胞的体外培养

为了探讨人原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)的体外分离培养条件及相关影响因素,以小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEF)作为饲养层,室温下用1.25 g/L胰蛋白酶+0.2 g/L EDTA消化人胚胎组织5～9 min,或用1 g/L胶原酶(Ⅳ型)消化20～40 min,分离得到PGCs,然后用不同培养液培养,从培养液角度较为系统的研究原代培养人原始生殖细胞的条件.结果表明,在KSR培养液(体积分数15 % Knockout serum replacement+高糖DMEM+10 ng/mL人重组白血病抑制因子(LIF)+4 ng/mL人重组碱性成纤维细胞生长因子+10 ng/mL Forskolin)和STO(建系的小鼠胚胎成纤维细胞)条件培养液中培养的原代人原始生殖细胞,有较高的克隆形成率;培养液中添加不同质量浓度的LIF对克隆形成率影响差异不大.

作 者： 于海生 华进联 王洪锋 杨炜峰 刘胜 蒋会婷 窦忠英 YU Hai-sheng HUA Jin-lian WANG Hong-feng YANG Wei-feng LIU Sheng JIANG Hui-ting DOU Zhong-ying   作者单位： 西北农林科技大学,国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心,陕西,杨凌,712100  刊 名： 西北农林科技大学学报（自然科学版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF NORTHWEST SCI-TECH UNIVERSITY OF AGRICULTURE AND FORESTRY(NATURAL SCIENCE EDITION)  年，卷(期)： 2006 34(2)  分类号： Q813.1+1  关键词： 原始生殖细胞   胚胎干细胞   白血病抑制因子   条件培养液   人  

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