抗转铁蛋白受体单链抗体的表达、纯化及活性测定

抗转铁蛋白受体单链抗体的表达、纯化及活性测定

根据转铁蛋白受体和转铁蛋白特异性结合的性质,利用亲和纯化的方法从胎盘中提取转铁蛋白受体.以转铁蛋白受体为抗原包被免疫管,从全合成人源噬菌体单链抗体库中筛选其抗体.对筛选到的抗体进行特异性鉴定后,将抗体基因插入表达载体pET22b(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导后获得可溶性表达.HeLa细胞的免疫组化结果显示,表达的抗体可以与转铁蛋白受体结合.表达产物经Ni-NTA金属螯和层析柱纯化、脱咪唑后,从尾静脉注射小鼠.1h后,去除血液及毛细血管的干扰,在脑实质中检测到了抗体的存在,说明该抗体可以通过血脑屏障.

作 者： 赵莉霞 颜冰 许龙 蒋世卫 张莹莹 杨志新 周晓巍 黄培堂 ZHAO Li-Xia YAN Bing XU Long JIANG Shi-Wei ZHANG Ying-Ying YANG Zhi-Xin ZHOU Xiao-Wei HUANG Pei-Tang   作者单位： 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071  刊 名： 生物工程学报  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 22(3)  分类号： Q78  关键词： 转铁蛋白受体   单链抗体   表达   纯化   血脑屏障  

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