红花石蒜 ISSR-PCR反应体系的建立

红花石蒜 ISSR-PCR反应体系的建立

以红花石蒜叶片基因组DNA为模板,分析了模板DNA、引物、dNTPs、Mg2+的浓度及Taq DNA聚合酶的用量对ISSR-PCR扩增结果的影响.建立了石蒜ISSR分析最优化的反应体系及应用程序:即25 μL反应体系中,有20 ng模板DNA、0.5 μmol·L-1随机引物、150 μmol·L-1 dNTPs、2.0 mmol·L-1 Mg2+、1.0 U Taq DNA聚合酶.反应程序为:94 ℃预变性5 min;然后45个循环:每个循环94 ℃变性45 s,55 ℃退火60 s,72 ℃延伸2 min;循环结束后72 ℃延伸7 min.

作 者： 杨志玲 冯刚利 谭梓峰 栾启福 王承南 YANG Zhi-ling FENG Gang-li TAN Zi-feng LUAN Qi-fu WANG Cheng-nan   作者单位： 杨志玲,谭梓峰,栾启福,YANG Zhi-ling,TAN Zi-feng,LUAN Qi-fu(中国林业科学研究院亚热带林业研究所,浙江富阳,311400)

冯刚利,FENG Gang-li(中国林业科学研究院亚热带林业研究所,浙江富阳,311400;中南林学院资源与环境学院,湖南长沙,410004)

王承南,WANG Cheng-nan(中南林学院资源与环境学院,湖南长沙,410004) 

刊 名： 林业科学研究  ISTIC PKU 英文刊名： FOREST RESEARCH  年，卷(期)： 2006 19(4)  分类号： S567.2  关键词： 红花石蒜   叶片   ISSR-PCR  

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