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猪脑心肌炎病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备及其识别表位分析
为获得针对猪源EMCV结构蛋白VP2的特异性单克隆抗体,本试验以EMCV结构蛋白VP2为对象,将EMCV BJC3株VP2基因定向插入穿梭质粒中,构建重组腺病毒AdV-VP2,免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体,利用Pepscan技术对单抗识别的抗原位点进行分析.结果显示,间接ELISA及间接免疫荧光法筛选获得了2个阳性细胞克隆株,命名为C11和G8.经检测杂交瘤细胞培养上清抗体效价为1:1 600,腹水效价分别为1:2.56×106和1:1.28×106,中和试验鉴定均无中和活性.Western-blot鉴定表明获得的2株单抗均能识别原核表达的重组VP2蛋白.亚类鉴定结果显示2株单抗均为IgG2b亚类,轻链均为κ型.Pepscan分析结果显示,这2株单抗可分别识别EMCV VP2蛋白上的2个B细胞线性表位.本研究获得的蛋白十分接近于其天然构象,很大程度上保证了病毒表面抗原位点的结构和功能.
作 者： 魏莹 盖新娜 贾红 郭鑫 杨汉春 WEI Ying GE Xin-na JIA Hong GUO Xin YANG Han-chun 作者单位： 中国农业大学农业部人畜共患病重点开放实验室,北京,100094 刊 名： 中国动物传染病学报 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF VETERINARY PARASITOLOGY 年，卷(期)： 2009 17(1) 分类号： S852.65 关键词： 脑心肌炎病毒 VP2蛋白 单克隆抗体 表位识别【猪脑心肌炎病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备及其识别表位分析】相关文章：
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