浅谈方便面中有害物质的检测与分析论文
国民经济发展迅速，人民生活水平不断提高，人们对食品的安全问题也越来越重视。本文基于对方便面中磷酸盐、亚硝酸盐和邻苯二甲酸二丁酯的检测探究方便面可能存在的食品安全问题。磷酸盐在其加工制品生产加工过程中起着重要的膨松、抗氧化等作用，当人体摄入过量的磷酸盐时，就有可能危害身体健康，长时间还会导致人体钙磷比例失衡。亚硝酸盐是一种毒性很强的致癌物，它能与胺类物质生成亚硝胺而致癌，摄入会对人体造成危害, 更为严重的是引起高铁血红蛋白症, 导致组织缺氧, 还可使血管扩张、血压降低。邻苯二甲酸酯是一类能起到软化作用的化学品，它被普遍应用于玩具、食品包装材料、医用血袋和胶管等数百种产品中。它是世界卫生组织1995 年公布的必须控制的一类扰乱内分泌的化学物质，不易被人体代谢，易于在人体肝脏中沉积，它们具有脂溶性、难分解性和高累积性，能损害人类的生殖系统，影响生物体内激素的正常分泌，导致细胞突变，致畸和致癌，日积月累将严重危害人类的健康。
1 面饼中磷酸盐的检测
国家卫生标准规定食品中添加的磷酸盐 ( 以磷酸根计) 不得超过 5.0g /kg[5]，小麦粉(面饼的主要成分)含有的磷主要以无机态存，按国标5009. 87 - 2003 《食品中磷的测定》第三法测定小麦粉制品的磷酸盐含量的方法，我们对泡面面饼内的磷酸盐的含量进行测定。
1.1 实验原理
试样中的磷酸盐与酸性钼酸铵作用, 生成淡黄色的磷钼酸盐, 此盐可经还原呈显蓝色, 一般称为钼蓝。蓝色的深浅与磷酸盐含量成正比。用分光光度法在波长650nm 处测定试样中磷酸盐含量。
1.2 材料、仪器与化学试剂
1.2.1 材料
A 康师傅鲜虾鱼板面;B 康师傅卤香牛肉面;C 白象老坛酸豆角牛肉面;钼酸铵;磷酸二氢钠(带有2 分子的结晶水);对苯二酚;亚硫酸钠;浓硫酸(AR);盐酸(AR);去离子水。
1.2.2 仪器
电子天平;风干箱;分光光度计;加热板;马弗炉。
1.2.3 化学试剂
硫酸(75%)： 取75ml 浓硫酸用去离子水稀释到100ml。盐酸(1+1)：取50ml 室温浓盐酸用去离子水稀释到100ml。钼酸铵溶液(50g/l)： 取25g 钼酸铵溶解在300ml 水中，再用75% 的H 2SO4 溶液定容到500ml。磷酸盐标准储备液(10ug/ml)：精确量取0.41g 的NaH2PO4·2H2O 用去离子水定容到500ml，在从这500ml的溶液中精确量取10ml 并用去离子水定容到500ml。
对苯二酚(5g/l)：现配现用，量取0.5g 的对苯二酚，用去离子水定容到100ml，再滴加一滴75% 的硫酸。亚硫酸钠溶液(200g/l)：现配现用，量取20g 的亚硫酸钠溶解成100ml 的溶液(在溶解中可能要加热使其溶解)。样液的制备: 分别取不同三个品牌的泡面面饼A、B、C 各20g 左右，用研钵研成粉状。然后在70℃ -80℃风干箱内风干5 个小时。在分别称取2g 于干锅中在550℃的马弗炉中灰化(升温1 小时，恒温5 小时，降温一小时)，完全灰化后是白色的粉状物质，若仍有黑色物质存在就重新灰化。得到三份产物分别加入(1+1)的盐酸2ml，并用去离子水定容到100ml。
1.3 实验过程
1.3.1 标准曲线绘制
分别吸取磷酸盐标准储备液0.0ml(零管溶液);7.0ml;8.0ml;9.0ml;10.0ml;11.0 ml 于25ml 的容量瓶中，再依次加入2ml 的钼酸铵溶液,1ml 的亚硫酸钠溶液,1ml 的对苯二酚，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀。静止40min 后，以零管溶液为空白，在分光光度计于650nm 处比色，测定各标准工作液的吸光度值，并绘制标准工作曲线。
1.3.2 样液的吸光度的测定
分别取去离子水、A 样液、B 样液、C 样液 各2ml 于25ml 的容量瓶中，再依次加入2ml 的钼酸铵溶液(50g/L);1ml 的亚硫酸钠溶液(200g/L);1ml的对苯二酚(5g/L)，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀。静止40min 后，以零管溶液为空白，在分光光度计于 650nm处比色，测定各样液的吸光度值。
1.3.3 计算过程
10b 25l gc mlmlμ×=式中C b 是磷酸盐标准工作液的质量浓度，单位：μg/ml。X= 25 100 1000 10 62 2x ml c ml gml g ×× × ×C x 是样品中磷酸盐的质量浓度(由标准工作曲线回归方程为y =0.0301x +65所得)，X 是每1kg 的面饼中所含的磷酸盐的质量，单位：g/kg。
1.4 结果
通过分光光度计检测可得到标准溶液的吸光度如下回归方程为 y = 0.0301x + 65 , 相关系数r = 0.9942; 在低浓度范围内(0-5ug/ml), 线性曲线良好。通过标准曲线回归方程以及样液的吸光度可计算样液中磷酸盐含量如下表：(注：A 为康师傅鲜虾鱼板面;B 为康师傅卤香牛肉面;C 为白象老坛酸豆角牛肉面)
1.5 结论
由以上图表分析可知方便面面饼中磷酸盐的含量在2.5g/kg-5.0g/kg 之间，接近于国家卫生标准使用量5.0g/kg。虽然没有超标，但经实验验证磷酸盐含量还是比较高的，不可多吃或长期食用。
2 料包中亚硝酸盐的检测
亚硝酸盐是食品添加剂的一种，起着色、防腐作用，被广泛用于熟肉类、灌肠类和罐头等动物性食品。按GB2760 规定一般食品中最大残留量为0.03g/kg[5]。摄入0.2-0.5 g 即可引起食物中毒，3 g 可致死。
2.1 实验原理
在弱酸性介质中, 亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，生成的重氮化合物, 再与盐酸萘乙二胺偶联成紫红色的偶氮染料的原理。用分光光度法在波长550nm 处测定试样中亚硝酸盐含量。
2.2 材料、仪器与化学试剂
2.2.1 材料
A 康师傅鲜虾鱼板面;B 康师傅卤香牛肉面;C 白象老坛酸豆角牛肉面;亚硝酸钠;对氨基苯磺酸;盐酸萘乙二胺;活性炭。
2.2.2 仪器
分光光度计;电子天平;干燥箱;抽滤机。
2.2.3 化学试剂
亚硝酸钠溶液(0.5mg/ml): 称取0.2500 g 已于干燥器中放置 24 h 的亚硝酸钠, 溶于500 ml 容量瓶中, 加水稀释至刻度。亚硝酸钠标准储备液(5μg/ml): 吸取上述亚硝酸钠标准溶液1 ml 于 100ml 容量瓶中, 加水稀释至刻度(现配先用)。
对氨基苯磺酸溶液(4g/l): 分别称取0.4g 溶于100 ml20% 盐酸溶液中,置棕色瓶中混匀, 避光保存。盐酸萘乙二胺溶液(2g/l): 称取0.2g 盐酸萘乙二胺, 溶解于100ml 水中,混匀后, 置于棕色瓶中, 避光保存。样液的处理：从三个不同品牌的泡面粉包中各取6 克样品，分别为A. 康师傅卤香牛肉面、B. 康师傅鲜虾鱼板面、C 白象老坛酸豆角牛肉面，将样品各自溶于烧杯中，并稀释至100mL，并进行一次抽滤，得到的液体加入活性炭，抽滤一次。得到待测样液。
2.3 实验过程
2.3.1 标准曲线绘制
吸取0ml(零管溶液),0.2 ml,0.4ml,0.6 ml, 0.8 ml,1.0 ml,1.5 ml,2.0ml5μg/ml 标准储备液, 于50 ml 容量瓶中, 分别加入 2 ml 对氨基苯磺酸(20% 盐酸) 溶液, 摇匀, 放置3 min-5min, 再加入 1 ml 盐酸萘乙二胺溶液,加水至刻度, 摇匀, 放置10 min, 以零管溶液为空白组，在 549 nm 处测其吸光度。绘制标准工作曲线。
2.3.2 样液的吸光度的测定[8]
分别取去离子水、A 样液、B 样液、C 样液 各4ml 于50ml 的容量瓶中，分别加入 2 ml 对氨基苯磺酸(20% 盐酸)溶液, 摇匀, 放置3min ～ 5min, 再加入1ml 盐酸萘乙二胺溶液, 加水至刻度,摇匀, 放置10min, 在549nm 处测其吸光度。
2.3.3 过程计算
5 /b 50c L g mlml× μ=式中C b 是亚硝酸盐工作液的.质量浓度，单位：μg/ml;L 是亚硝酸盐标准储备液(5ug/ml)的加入量。单位:ml。50 100 1000 10 62 x 6X ml c ml gml g= × × × × C x 是待测样液(测吸光度)的亚硝酸盐质量浓度(由标准工作曲线回归方程y=0.7717x+0.0011 计算得)。单位：μg/mlX 是每1kg 的调味粉中所含的亚硝酸盐的质量。单位：g/kg
2.4 结果
通过分光光度计检测可得到标准溶液的吸光度如下：综上数据得：回归方程为y = 0.7717x + 0.001 , 相 关系 数R2= 0.998; 在低浓度范围内(0 ～ 0.2μg/ml), 线性曲线良好。通过标准曲线回归方程以及样液的吸光度可计算样品中亚硝酸盐的含量：(注：A 为康师傅鲜虾鱼板面;B为康师傅卤香牛肉面;C 为白象老坛酸豆角牛肉面。
2.5 结论
由以上图标可得三种泡面中，亚硝酸盐含量都是合格的，其中康师傅鲜虾鱼板面最低，白象老坛酸豆角牛肉面最高，虽然都未超过国标GB2760规定残留量0.03 g/kg，但是每天人体摄入的其他食物中也会有亚硝酸盐，出于对健康的考虑，建议每天最多可吃一包方便面。
3 包装桶中邻苯二甲酸二丁酯的溶出检测
方便面以其美味、便捷成为大学生经常食用的食品，但其包装的安全问题却常被忽略。本实验完全模拟方便面的浸泡环境，针对碗装方便面包装物中DBP(邻苯二甲酸二丁酯)向浸泡液的迁移情况，采用高效液相色谱法，对DBP 的溶出量进行研究。
3.1 实验原理
将剪碎后的内膜用溶有酱包、调味包的沸水浸泡，用高效液相色谱法进行样液检测，通过标准曲线计算出样液中DBP 的含量。2002 / 72 / EEC指令规定了包装材料中化学物迁移的最高值[9], 塑料包装物或容器在包装和盛放、贮存食品的过程中，以容器形式盛装食品的, 该容器迁移到食品中的物质总量不能超过60mg/ kg。
3.2 材料和方法
3.2.1 仪器与设备
高效液相色谱仪;抽滤机;电子天平等。
3.2.2 试剂与材料
DBP 标准品;甲醇(色谱纯);去离子水;各种品牌方便面。
3.2.3 标准储备液的制备
称取标准品DBP0.0065g，溶于6.5ml甲醇中，得到浓度为1mg/ml 的标准储备液量取标准储备液1ml 于100ml 容量瓶中，甲醇定容，得到浓度为0.01mg/ml 的混合储备液。将混合储备液密封保存。
3.2.4 方便面桶的试样处理
方便面的纸杯取出，取其中最内层塑料薄膜，清洗掉纸层，晾干，备用。将塑料薄膜剪碎后置于500ml 烧杯中，加入酱包、调味包，然后倒入300ml 沸水，烧杯口用纸层盖住，浸泡10min, 然后进行抽滤。得到的样液准备液相处理。
3.2.5 液相色谱条件
色谱柱：Agilent HC-C18 柱(4.6mmi.d.×250mm，5μm);柱温：常温;流动相：水：甲醇=10：90;流速1ml/min;检测波长228nm。
3.3 结果与分析
3.3.1 标准曲线图谱
标准品色谱图如图3-1，浓度为0.01mg/ml，进样量为20ul。DBP 的保留时间在5.367 左右。
3.3.2 标准工作曲线
分别取0.01mg/ml 的标准储备液1ul、2ul、5ul、10ul、20ul， 按液相色谱法进行测定，外标法定量。以色谱峰的峰面积为纵坐标，DBP 的质量(ug)为横坐标绘制标准工作曲线如图3-2，回归方程和相关系数见表3-1。结果表明，DBP(邻苯二甲酸二丁酯)的质量在0.01-0.2μg 范围与峰面积呈较好的线性关系，相关系数大于0.997。
3.3.3 样品检测结果
对于不同品牌方便面桶处理溶液，均取10ul 进行高效液相分析, 并按照标准曲线计算出3 个样品中DBP 的含量: (注：A 为康师傅鲜虾鱼板面;B为康师傅卤香牛肉面;C 为白象老坛酸豆角牛肉面。)
3.4 结论
试验结果表明，采用模拟液浸泡方法，结合高效液相色谱分析手段对方便面包装物中DBP(邻苯二甲酸二丁酯)的含量进行测定，方便面包装物浸泡液中检出邻苯二甲酸二丁酯，表明包装物中邻苯二甲酸二丁酯在浸泡食用条件下具有溶出的可能。
4 结语
从本实验探究结果来看，三种化学成分的含量虽然在国标内，但是食用多包方便面这些有害物质的摄入量就有可能超标，日积月累会对人体造成不可估量的伤害。而且，方便面作为一种快餐，无法满足人体进行正常生命活动的营养需求。因此向广大学生及上班族倡导：少吃泡面，健康饮食。
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